蛋白裂解酶抗體,Matriptase,
產(chǎn)品類型 一抗
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我公司*供應(yīng)免疫組化抗體、WB抗體、免疫組化試劑盒和抗體試驗(yàn)所需全部相關(guān)試劑、熒光標(biāo)記抗體、elisa抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、各種標(biāo)記的二抗IgG/IgM/IgD/IgA等科研實(shí)驗(yàn)抗體,歡迎新老客戶訂購(gòu)。
蛋白裂解酶抗體,Matriptase,Western的經(jīng)驗(yàn):
1.關(guān)于反復(fù)標(biāo)記和再標(biāo)記:一張膜上可以同時(shí)標(biāo)記很多抗體,但要注意,一般在兩個(gè)目的蛋白相差在5KD以上的,先后兩個(gè)抗體是不同的二抗.在兩個(gè)目的片段相差小于5KD時(shí),就需要經(jīng)過(guò)處理,再標(biāo)記了(Re-Blot),有些公司有再標(biāo)記的現(xiàn)成試劑,不過(guò)比較貴,zui簡(jiǎn)單的方法是:ddH2O洗5分鐘,0.2MNaOH5分鐘,再用ddH2O5分鐘*3次,然后可以再標(biāo)記了.要做多個(gè)抗體的膜\的選擇,用PVDF或教堅(jiān)固的,*用Amsham的Hybond-P,Hybond-Extra.本人zui多在一張膜上做個(gè)10個(gè)不同的抗體.
2.關(guān)于轉(zhuǎn)膜時(shí)的溫度:轉(zhuǎn)膜時(shí)的溫度比較重要,保持在10度以下,可以用冰浴(Pharmacia的轉(zhuǎn)膜裝置),也可以在轉(zhuǎn)膜液中放入合適的事先準(zhǔn)備的冰袋(-70度>3小時(shí))(Bio-Rad),這樣既可以降溫又可以節(jié)約Buffer.
3.關(guān)于三名治:本人以前做時(shí)花很多時(shí)間在防止短路上,現(xiàn)在我做的時(shí)候根本沒有剪齊,zui主要的是趕氣泡,這是關(guān)鍵的關(guān)鍵,其實(shí)轉(zhuǎn)膜的原理是電流的單向流動(dòng),現(xiàn)在的好多公司的轉(zhuǎn)膜裝置的電極是一個(gè)平面,所以不用擔(dān)心短路的.(不信的可以試試!!)
4.關(guān)于轉(zhuǎn)膜電流和時(shí)間:一般轉(zhuǎn)膜的電流在200mA-400mA之間時(shí)間為1小時(shí),大片段的>50KD的可以選用350mA,小片段的可以用250mA,不過(guò)本人覺得上述電流均能很好的把大部分蛋白轉(zhuǎn)過(guò)去.
5.用脫脂奶粉封閉的效果不一定比用BSA差,不過(guò)我們?cè)囘^(guò)幾種奶粉,有一些奶粉不太適合.*使用的奶粉:雀巢高鈣奶粉,多力精低脂奶粉.一般國(guó)產(chǎn)的奶粉,部分相關(guān)產(chǎn)品:
Ys-1723R 甘露聚糖結(jié)合凝集素*肽酶1抗體 MASP
Ys-1980R 甘露聚糖結(jié)合凝集素*肽酶2抗體 MASP2
Ys-0531R 蛋白裂解酶(一種新的癌基因)抗體 Matriptase
Ys-0380R 髓鞘堿性蛋白抗體 MBP
Ys-0271R 巨細(xì)胞病毒PP65/CMV低基質(zhì)磷脂蛋白抗體 CMV/HCMV PP65/HHV5 PP65
Ys-2271R 人巨細(xì)胞病毒 HCMV
Ys-0896R 人巨細(xì)胞病毒UL23抗體 HCMV UL23
Ys-0808R 人巨細(xì)胞病毒UL49蛋白抗體 HCMV UL49
Ys-1101R 單核細(xì)胞趨化蛋白1抗體(大、小鼠) MCP-1/CCL2
Ys-1955R 單核細(xì)胞趨化蛋白1抗體(人) MCP-1/CCL2
Ys-1984R 單核細(xì)胞趨化蛋白2抗體(人) MCP-2/CCL8
Ys-1985R 單核細(xì)胞趨化蛋白2抗體(大、小鼠) MCP-2/CCL8
Ys-1986R 單核細(xì)胞趨化蛋白3抗體 MCP-3/CCL7
Ys-1987R 單核細(xì)胞趨化蛋白3抗體 MCP-3/CCL7
Ys-2477R 巨噬細(xì)胞炎癥蛋白-1γ抗體 CCL9/CCL10
Ys-2725R 肥大細(xì)胞蛋白酶7抗體 Mast Cell Tryptase
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