原癌基因M-ras抗體,Anti-MRAS/Mras,
產(chǎn)品類型 一抗
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我公司*供應(yīng)免疫組化抗體、WB抗體、免疫組化試劑盒和抗體試驗(yàn)所需全部相關(guān)試劑、熒光標(biāo)記抗體、elisa抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、各種標(biāo)記的二抗IgG/IgM/IgD/IgA等科研實(shí)驗(yàn)抗體,歡迎新老客戶訂購。
原癌基因M-ras抗體,Anti-MRAS/Mras,Western的經(jīng)驗(yàn):
1.關(guān)于反復(fù)標(biāo)記和再標(biāo)記:一張膜上可以同時(shí)標(biāo)記很多抗體,但要注意,一般在兩個(gè)目的蛋白相差在5KD以上的,先后兩個(gè)抗體是不同的二抗.在兩個(gè)目的片段相差小于5KD時(shí),就需要經(jīng)過處理,再標(biāo)記了(Re-Blot),有些公司有再標(biāo)記的現(xiàn)成試劑,不過比較貴,zui簡單的方法是:ddH2O洗5分鐘,0.2MNaOH5分鐘,再用ddH2O5分鐘*3次,然后可以再標(biāo)記了.要做多個(gè)抗體的膜\的選擇,用PVDF或教堅(jiān)固的,*用Amsham的Hybond-P,Hybond-Extra.本人zui多在一張膜上做個(gè)10個(gè)不同的抗體.
2.關(guān)于轉(zhuǎn)膜時(shí)的溫度:轉(zhuǎn)膜時(shí)的溫度比較重要,保持在10度以下,可以用冰浴(Pharmacia的轉(zhuǎn)膜裝置),也可以在轉(zhuǎn)膜液中放入合適的事先準(zhǔn)備的冰袋(-70度>3小時(shí))(Bio-Rad),這樣既可以降溫又可以節(jié)約Buffer.
3.關(guān)于三名治:本人以前做時(shí)花很多時(shí)間在防止短路上,現(xiàn)在我做的時(shí)候根本沒有剪齊,zui主要的是趕氣泡,這是關(guān)鍵的關(guān)鍵,其實(shí)轉(zhuǎn)膜的原理是電流的單向流動(dòng),現(xiàn)在的好多公司的轉(zhuǎn)膜裝置的電極是一個(gè)平面,所以不用擔(dān)心短路的.(不信的可以試試!!)
4.關(guān)于轉(zhuǎn)膜電流和時(shí)間:一般轉(zhuǎn)膜的電流在200mA-400mA之間時(shí)間為1小時(shí),大片段的>50KD的可以選用350mA,小片段的可以用250mA,不過本人覺得上述電流均能很好的把大部分蛋白轉(zhuǎn)過去.
5.用脫脂奶粉封閉的效果不一定比用BSA差,不過我們試過幾種奶粉,有一些奶粉不太適合.*使用的奶粉:雀巢高鈣奶粉,多力精低脂奶粉.一般國產(chǎn)的奶粉,部分相關(guān)產(chǎn)品:
Ys-1882R 原癌基因M-ras抗體 Anti-MRAS/Mras
Ys-3503R DNA損傷關(guān)鍵蛋白Mre11抗體 Anti-Mre11/HNGS1
Ys-3293R 磷酸化DNA損傷關(guān)鍵蛋白Mre11抗體 Anti-Phospho-Mre11 (Ser676)
Ys-1061R 髓過氧化物酶抗體 Anti-MPO
Ys-1850R 鹽皮質(zhì)激素受體抗體 Anti-MR(Mineralocorticoid receptor)
Ys-0657R 多藥耐藥相關(guān)蛋白1抗體 Anti-MRP1
Ys-1092R 多藥耐藥相關(guān)蛋白2抗體 Anti-MRP2
Ys-0656R 多藥耐藥相關(guān)蛋白3抗體 Anti-MRP3
Ys-1422R 多藥耐藥相關(guān)蛋白4抗體 Anti-MRP4/ABCC4
Ys-1437R 多藥耐藥相關(guān)蛋白5抗體 Anti-MRP5/ABCC5
Ys-0818R 線粒體核糖體蛋白L28抗體 Anti-MrpL28
Ys-1848R 促黑細(xì)胞激素α抗體 Anti-Alpha-MSH/POMC
Ys-0758R 錯(cuò)配修復(fù)蛋白2抗體 Anti-MSH-2
Ys-2995R 有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激酶1抗體 Anti-MSK1
Ys-3281R 磷酸化有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激酶1抗體 Anti-Phospho-MSK1 (Ser360)
Ys-3282R 磷酸化有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激酶1抗體 Anti-Phospho-MSK1 (Ser212)
Ys-3283R 磷酸化有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激酶1抗體 Anti-Phospho-MSK1 (Ser376)
Ys-3284R 磷酸化有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激酶1抗體 Anti-Phospho-MSK1 (Thr581)
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