上皮鈣粘附分子抗體Anti-E-cadherin,
產(chǎn)品類型 一抗
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我公司*供應(yīng)免疫組化抗體、WB抗體、免疫組化試劑盒和抗體試驗所需全部相關(guān)試劑、熒光標(biāo)記抗體、elisa抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、各種標(biāo)記的二抗IgG/IgM/IgD/IgA等科研實驗抗體,歡迎新老客戶訂購。
上皮鈣粘附分子抗體Anti-E-cadherin,Western的經(jīng)驗:
1.關(guān)于反復(fù)標(biāo)記和再標(biāo)記:一張膜上可以同時標(biāo)記很多抗體,但要注意,一般在兩個目的蛋白相差在5KD以上的,先后兩個抗體是不同的二抗.在兩個目的片段相差小于5KD時,就需要經(jīng)過處理,再標(biāo)記了(Re-Blot),有些公司有再標(biāo)記的現(xiàn)成試劑,不過比較貴,zui簡單的方法是:ddH2O洗5分鐘,0.2MNaOH5分鐘,再用ddH2O5分鐘*3次,然后可以再標(biāo)記了.要做多個抗體的膜\的選擇,用PVDF或教堅固的,*用Amsham的Hybond-P,Hybond-Extra.本人zui多在一張膜上做個10個不同的抗體.
2.關(guān)于轉(zhuǎn)膜時的溫度:轉(zhuǎn)膜時的溫度比較重要,保持在10度以下,可以用冰?。≒harmacia的轉(zhuǎn)膜裝置),也可以在轉(zhuǎn)膜液中放入合適的事先準(zhǔn)備的冰袋(-70度>3小時)(Bio-Rad),這樣既可以降溫又可以節(jié)約Buffer.
3.關(guān)于三名治:本人以前做時花很多時間在防止短路上,現(xiàn)在我做的時候根本沒有剪齊,zui主要的是趕氣泡,這是關(guān)鍵的關(guān)鍵,其實轉(zhuǎn)膜的原理是電流的單向流動,現(xiàn)在的好多公司的轉(zhuǎn)膜裝置的電極是一個平面,所以不用擔(dān)心短路的.(不信的可以試試!!)
4.關(guān)于轉(zhuǎn)膜電流和時間:一般轉(zhuǎn)膜的電流在200mA-400mA之間時間為1小時,大片段的>50KD的可以選用350mA,小片段的可以用250mA,不過本人覺得上述電流均能很好的把大部分蛋白轉(zhuǎn)過去.
5.用脫脂奶粉封閉的效果不一定比用BSA差,不過我們試過幾種奶粉,有一些奶粉不太適合.*使用的奶粉:雀巢高鈣奶粉,多力精低脂奶粉.一般國產(chǎn)的奶粉,部分相關(guān)產(chǎn)品:
Ys-1519R 上皮鈣粘附分子抗體 Anti-E-cadherin
Ys-1466R NCK銜接因子蛋白2抗體 Anti-Nck1/Nck2
Ys-3561R 核受體輔助激活蛋白2抗體 Anti-NCOA2/KAT13C
Ys-0224R 核受體輔助抑制因子1抗體 Anti-NCoR1
Ys-3506R 泛素連接酶NEDD4-2抗體 Anti-NEDD4L/NEDD4-2
Ys-3299R 磷酸化泛素連接酶NEDD4-2抗體 Anti-Phospho-NEDD4L (Ser342)
Ys-1420R 核受體輔助抑制因子2抗體 Anti-NCoR2
Ys-2402R 金屬肽鏈內(nèi)切酶抗體 Anti-NEP/MME
Ys-1584R 分化相關(guān)基因NDRG1抗體 Anti-NDRG1/Cap43
Ys-3297R 磷酸化分化相關(guān)基因NDRG1抗體 Anti-Phospho-NDRG1 (Ser330)
Ys-3298R 磷酸化分化相關(guān)基因NDRG1抗體 Anti-Phospho-NDRG1 (Thr346)
Ys-1998R 抑癌基因NDRG2抗體 Anti-NDRG2
Ys-3688R 抑癌基因NDRG3抗體 Anti-NDRG3
Ys-1999R 抑癌基因NDRG4抗體 Anti-NDRG4
Ys-3552R 新的飽食分子蛋白抗體 Anti-Nesfatin-1/Nucb2
Ys-1550R 鈉鈣交換蛋白1抗體 Anti-NCX1/SLC8A1
Ys-1997R 鈉鈣交換蛋白2抗體 Anti-NCX2/SLC8A2
Ys-2401R 伴肌動蛋白抗體 Anti-Nebulin
Ys-2057R 鈉鈣交換蛋白3抗體 Anti-NCX3(Na+/Ca2+ exchanger3)
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