神經(jīng)上皮干細胞蛋白抗體,Anti-Nestin,
產(chǎn)品類型 一抗
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我公司*供應(yīng)免疫組化抗體、WB抗體、免疫組化試劑盒和抗體試驗所需全部相關(guān)試劑、熒光標(biāo)記抗體、elisa抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、各種標(biāo)記的二抗IgG/IgM/IgD/IgA等科研實驗抗體,歡迎新老客戶訂購。
神經(jīng)上皮干細胞蛋白抗體,Anti-Nestin,Western的經(jīng)驗:
1.關(guān)于反復(fù)標(biāo)記和再標(biāo)記:一張膜上可以同時標(biāo)記很多抗體,但要注意,一般在兩個目的蛋白相差在5KD以上的,先后兩個抗體是不同的二抗.在兩個目的片段相差小于5KD時,就需要經(jīng)過處理,再標(biāo)記了(Re-Blot),有些公司有再標(biāo)記的現(xiàn)成試劑,不過比較貴,zui簡單的方法是:ddH2O洗5分鐘,0.2MNaOH5分鐘,再用ddH2O5分鐘*3次,然后可以再標(biāo)記了.要做多個抗體的膜\的選擇,用PVDF或教堅固的,*用Amsham的Hybond-P,Hybond-Extra.本人zui多在一張膜上做個10個不同的抗體.
2.關(guān)于轉(zhuǎn)膜時的溫度:轉(zhuǎn)膜時的溫度比較重要,保持在10度以下,可以用冰?。≒harmacia的轉(zhuǎn)膜裝置),也可以在轉(zhuǎn)膜液中放入合適的事先準備的冰袋(-70度>3小時)(Bio-Rad),這樣既可以降溫又可以節(jié)約Buffer.
3.關(guān)于三名治:本人以前做時花很多時間在防止短路上,現(xiàn)在我做的時候根本沒有剪齊,zui主要的是趕氣泡,這是關(guān)鍵的關(guān)鍵,其實轉(zhuǎn)膜的原理是電流的單向流動,現(xiàn)在的好多公司的轉(zhuǎn)膜裝置的電極是一個平面,所以不用擔(dān)心短路的.(不信的可以試試!!)
4.關(guān)于轉(zhuǎn)膜電流和時間:一般轉(zhuǎn)膜的電流在200mA-400mA之間時間為1小時,大片段的>50KD的可以選用350mA,小片段的可以用250mA,不過本人覺得上述電流均能很好的把大部分蛋白轉(zhuǎn)過去.
5.用脫脂奶粉封閉的效果不一定比用BSA差,不過我們試過幾種奶粉,有一些奶粉不太適合.*使用的奶粉:雀巢高鈣奶粉,多力精低脂奶粉.一般國產(chǎn)的奶粉,部分相關(guān)產(chǎn)品:
Ys-0006R 巢蛋白/神經(jīng)上皮干細胞蛋白抗體 Anti-Nestin
Ys-0008R 巢蛋白/神經(jīng)上皮干細胞蛋白抗體(大、小鼠) Anti-Nestin
Ys-0268R 蛋白激酶錨定蛋白抗體 Anti-Neurobeachin
Ys-1473R 蛋白激酶A錨定蛋白95抗體 Anti-AKAP95
Ys-1613R 神經(jīng)元核抗原抗體 Anti-NeuN
Ys-2464R 轉(zhuǎn)化神經(jīng)突起蛋白抗體 Anti-Nrn1/Cpg15/Neuritin
Ys-1055R 神經(jīng)粘蛋白抗體 Anti-Neurocan
Ys-1859R 腦紅蛋白/神經(jīng)血紅蛋白抗體 Anti-NGB
Ys-1517R 神經(jīng)元分化因子1抗體 Anti-NeuroD1
Ys-0289R 神經(jīng)束蛋白-155 Anti-Neurofascin/Nfasc155
Ys-0072R 神經(jīng)降壓素抗體 Anti-NT
Ys-1366R 2型神經(jīng)纖維瘤抗體 Anti-NF2/merlin
Ys-3291R 磷酸化2型神經(jīng)纖維瘤抗體 Anti-Phospho-Merlin (Ser518)
Ys-1417R 活化T細胞核因子1蛋白 Anti-NFATc1
Ys-2680R NFAM1抗體 Anti-NFAM1/CNAIP
Ys-2669R 磷酸化NFATc2(Ser326)抗體 Anti-phospho-NFATc2(Ser326)
Ys-2400R DNA損傷關(guān)卡蛋白1抗體 Anti-NFBD1/MDC1
Ys-0708R 高分子量神經(jīng)絲蛋白抗體 Anti-NF-H
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