緊密連接蛋白抗體,anti-OCLN/Occludin,
產(chǎn)品類型 一抗
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我公司*供應(yīng)免疫組化抗體、WB抗體、免疫組化試劑盒和抗體試驗(yàn)所需全部相關(guān)試劑、熒光標(biāo)記抗體、elisa抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、各種標(biāo)記的二抗IgG/IgM/IgD/IgA等科研實(shí)驗(yàn)抗體,歡迎新老客戶訂購。
緊密連接蛋白抗體,anti-OCLN/Occludin,Western的經(jīng)驗(yàn):
1.關(guān)于反復(fù)標(biāo)記和再標(biāo)記:一張膜上可以同時標(biāo)記很多抗體,但要注意,一般在兩個目的蛋白相差在5KD以上的,先后兩個抗體是不同的二抗.在兩個目的片段相差小于5KD時,就需要經(jīng)過處理,再標(biāo)記了(Re-Blot),有些公司有再標(biāo)記的現(xiàn)成試劑,不過比較貴,zui簡單的方法是:ddH2O洗5分鐘,0.2MNaOH5分鐘,再用ddH2O5分鐘*3次,然后可以再標(biāo)記了.要做多個抗體的膜\的選擇,用PVDF或教堅(jiān)固的,*用Amsham的Hybond-P,Hybond-Extra.本人zui多在一張膜上做個10個不同的抗體.
2.關(guān)于轉(zhuǎn)膜時的溫度:轉(zhuǎn)膜時的溫度比較重要,保持在10度以下,可以用冰浴(Pharmacia的轉(zhuǎn)膜裝置),也可以在轉(zhuǎn)膜液中放入合適的事先準(zhǔn)備的冰袋(-70度>3小時)(Bio-Rad),這樣既可以降溫又可以節(jié)約Buffer.
3.關(guān)于三名治:本人以前做時花很多時間在防止短路上,現(xiàn)在我做的時候根本沒有剪齊,zui主要的是趕氣泡,這是關(guān)鍵的關(guān)鍵,其實(shí)轉(zhuǎn)膜的原理是電流的單向流動,現(xiàn)在的好多公司的轉(zhuǎn)膜裝置的電極是一個平面,所以不用擔(dān)心短路的.(不信的可以試試!!)
4.關(guān)于轉(zhuǎn)膜電流和時間:一般轉(zhuǎn)膜的電流在200mA-400mA之間時間為1小時,大片段的>50KD的可以選用350mA,小片段的可以用250mA,不過本人覺得上述電流均能很好的把大部分蛋白轉(zhuǎn)過去.
5.用脫脂奶粉封閉的效果不一定比用BSA差,不過我們試過幾種奶粉,有一些奶粉不太適合.*使用的奶粉:雀巢高鈣奶粉,多力精低脂奶粉.一般國產(chǎn)的奶粉,部分相關(guān)產(chǎn)品:
Ys-1495R 緊密連接蛋白抗體 anti-OCLN/Occludin
Ys-1241R 緊密連接蛋白-5抗體 Anti-claudin 5
Ys-1075R 陽離子轉(zhuǎn)運(yùn)器1抗體 Anti-OCT1
Ys-1077R 陽離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體 Anti-OCT2
Ys-0830R 胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白抗體 Anti-Oct-4(Octamer-4)
Ys-1111R 胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白抗體 Anti-Oct-4(Octamer-4)
Ys-1294R *脫羧酶抗體 Anti-ODC
Ys-3687R 8-羥基*DNA糖基化酶 Anti-OGG1/8 hydroxyguanine DNA glycosylase
Ys-1200R 少突細(xì)胞髓磷脂糖蛋白抗體 Anti-Omgp
Ys-2086R 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌膜通道蛋白抗體 Anti-ompF(putative outer membrane porin F protein)
Ys-2173R 嗅球蛋白1抗體 Anti-OLFM1
Ys-1081R 阿片樣物質(zhì)結(jié)合蛋白/細(xì)胞粘附分子樣蛋白抗體 Anti-OPCML
Ys-0431R 骨保護(hù)蛋白/護(hù)骨素抗體 Anti-OPG
Ys-2695R 核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB受體抗體 Anti-RANK
Ys-0747R 骨保護(hù)蛋白配體抗體(破骨細(xì)胞分化因子) Anti-OPGL/ODF
Ys-0019R 骨橋蛋白抗體(分泌型磷蛋白1)人 Anti-OPN
Ys-0026R 骨橋蛋白抗體(分泌型磷蛋白1) Anti-OPN
Ys-1181R 增食欲素-A/欲激素A Anti-Orexin-A
Ys-1110R 成骨相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體 Anti-Osterix
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