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人葡萄糖激酶(GCK)Elisa試劑盒注意事項(xiàng)

時間:2014-6-23閱讀:280
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人葡萄糖激酶(GCK)Elisa試劑盒注意事項(xiàng)

1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未
用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
3. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時間
控制在5 分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD 值
大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,計(jì)
算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

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實(shí)驗(yàn)原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人葡萄糖激酶(GCK)水平。用純化的人葡萄糖
激酶(GCK)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入葡萄糖激酶
(GCK),再與HRP 標(biāo)記的葡萄糖激酶(GCK)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)
過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)
化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的葡萄糖激酶(GCK)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波
長下測定吸光度(OD 值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人葡萄糖激酶(GCK)含量。

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