導(dǎo)讀：ELISA試劑盒是一種十分常用的定性定量方法，人體和動物、體外細胞培養(yǎng)中超過80％蛋白定量都使用其作為檢測的手段。
　　
　　測定原理：現(xiàn)在ELISA試劑盒除非是測定抗體的以外，一般使用的是雙抗體夾心法，此種方法大多數(shù)用的是增強的雙抗體夾心法，即使用*-親和素系統(tǒng)，還有少數(shù)的指標可能使用競爭法，這類方法適用于半抗原的測定。
　　
　　具有復(fù)雜結(jié)構(gòu)的多表位蛋白抗原，其雙抗體夾心法中的一個抗體必須用單抗，否則背景很高。當(dāng)然如果兩個都是單抗(這兩個單抗針對不同表位)，那么測定的線性范圍就較寬，試劑盒性能就較好；一個用單抗，一個用多抗，測定的靈敏度會較高。
　　
　　某些簡單的化合物用ELISA測定時，因為沒有兩個或以上的表位，一般只能作為半抗原，只能用競爭法測定。如果你發(fā)現(xiàn)有測定簡單化合物(如雌激素、NO、地高辛等)用雙抗體夾心法作測定原理時，這個試劑盒你就要懷疑了。另外還要說明一步雙抗體夾心法與兩步雙抗體夾心法的區(qū)別。
　　
　　一步雙抗體夾心法的吸光度-劑量曲線呈鐘形，隨著待則標本中抗原濃度的增加而升高至一定程度后，測定吸光度即隨抗原濃度的增加而開始下降直至不顯色，即所謂的“鉤狀效應(yīng)”(hookeHect)，也就是我們在免疫沉淀試驗中所稱的“帶現(xiàn)象”(zonephenomenon)。所以當(dāng)使用一步雙抗體夾心法時，樣品濃度太高，有時會出現(xiàn)測不出來的現(xiàn)象，此時要作適當(dāng)?shù)南♂尣拍軠蚀_測定。

試劑盒的組成：用雙抗體夾心法作為測定的方法時，試劑盒的組成一般包括： 已包被單抗的酶標板：一塊，有96孔的，也有48孔的，可拆缷，外面有鋁箔袋密封，打開后有干燥劑，實驗時暫未使用的酶標條要連帶干燥劑密封好，放在4℃冰箱中妥善保存。

 而應(yīng)用于科研的試劑盒，國家則沒有出臺相關(guān)的質(zhì)量管理規(guī)定，因此試劑盒質(zhì)量也就無法保障。