人胰島素樣生長因子2（IGF-2）ELISA試劑盒 使用目的：

本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中待測指標的含量。

實驗原理：

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中樣本中待測指標的水平。

試劑盒組成： 

1 30倍濃縮洗滌液 20ml×1瓶 7 終止液 6ml×1瓶 

2 酶標試劑 6ml×1瓶 8 標準品（240ng/L） 0.5ml×1瓶 

3 酶標包被板 12孔×8條 9 標準品稀釋液 1.5ml×1瓶 

4 樣品稀釋液 6ml×1瓶 10 說明書 1份 

5 顯色劑A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2張  

6 顯色劑B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1個 

人胰島素樣生長因子2（IGF-2）ELISA試劑盒標本要求

1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融

2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

操作步驟

1.         標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

120ng/L 5號標準品 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液 

60ng/L 4號標準品 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液 

30ng/L 3號標準品 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液 

15ng/L 2號標準品 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液 

7.5ng/L 1號標準品 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液 

2.         加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3.         溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   

4.         配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5.         洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

6.         加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7.         溫育：操作同3。

8.         洗滌：操作同5。

9.         顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10.     終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

11.     測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

操作程序總結：

計算

  以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。

注意事項

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。

3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數(shù)量多，*使用排槍加樣。

4． 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。

5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物請避光保存。

7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9．本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。

保存條件及有效期

1．試劑盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6個月

迪測生物ELISA試劑盒的五大優(yōu)點：

一、高效、靈敏、特異的抗體；

二、穩(wěn)定的重復性和可靠性；

三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；

四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型；

五、zui大限度的節(jié)省實驗經費。

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