產(chǎn)品名稱：直銷人免疫核糖核酸（Irna）ELISA試劑盒
英文名稱：Human Immune RNA,Irna ELISA 試劑盒
 

產(chǎn)品貨號：B-21258

實(shí)驗(yàn)方法：酶聯(lián)免疫法/酶免法（ELISA）

檢測原理： 采用雙抗體夾心ABC-ELISA原理

（一）　原理

　　ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、牽9體的特異性反應(yīng)與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物，從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實(shí)際應(yīng)用中，通過不同的設(shè)計，具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測抗體的間接法（圖a）、用于檢測抗原的雙抗體夾心法（圖b）以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。 　　 

（二）　直銷人免疫核糖核酸（Irna）ELISA試劑盒
操作步驟

     方法一　用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:

　　1.　包被：用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg／ml。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡稱洗滌，下同）。

　　2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃孵育1小時。然后洗滌。（同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔）。

　　3.　加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃孵育0.5～1小時，洗滌。

　　4.　加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。

　　5.　終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。

　　6.　結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+"、“-"號表示。也可測O•D值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔O•D值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。

　　方法二　用于檢測未知抗體的間接法：　　　

　　用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg／ml，每孔加0.1ml，4℃過夜。次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。（同時做空白、陰性及陽性孔對照）于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體（抗抗體）0.1ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法"的4、5、6。

相關(guān)產(chǎn)品：

人成纖維細(xì)胞生長因子21（fgf-21）ELISA試劑盒 Human fibroblast growth factor 21，fgf-21 ELISA Kit

人彈力蛋白酶-1 ELISA試劑盒 Human Elastase 1 ELISA Kit

人蛋白激酶C受體1（RACK1）ELISA試劑盒 Human receptor of actived C kinase 1，RACK1 ELISA Kit

人蛋白磷酸酯酶-2A（PP-2A）ELISA試劑盒 Human Protein phosphatase 2A，PP-2A ELISA Kit

人登革熱IgG（Dengue IgG）ELISA試劑盒 Human Dengue IgG ELISA Kit

人登革熱IgM（Dengue IgM）ELISA試劑盒 Human Dengue IgM ELISA Kit

人肺炎鏈球菌抗原（SP Ag）ELISA試劑盒 Human streptococcus pneumophila antigen,SP Ag ELISA Kit

人肺炎衣原體（Cpn）ELISA試劑盒 Human Cpn ELISA Kit

人肺炎支原體IgM抗體（MP-IgM）ELISA試劑盒 Human MP-IgM ELISA Kit

人肺炎支原體抗原（MP Ag）ELISA試劑盒 Human MP Ag ELISA Kit