產(chǎn)品名稱：小鼠*受體（TR）ELISA試劑盒您的*
英文名稱：Mouse thrombin receptor,TR ELISA 試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào)：B-21966

實(shí)驗(yàn)方法：酶聯(lián)免疫法/酶免法（ELISA）

檢測(cè)原理： 采用雙抗體夾心ABC-ELISA原理

（一）　原理

　　ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、牽9體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物，從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實(shí)際應(yīng)用中，通過不同的設(shè)計(jì)，具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測(cè)抗體的間接法（圖a）、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法（圖b）以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭(zhēng)法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。 　　 

（二）　小鼠*受體（TR）ELISA試劑盒您的*
操作步驟

     方法一　用于檢測(cè)未知抗原的雙抗體夾心法:

　　1.　包被：用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg／ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡(jiǎn)稱洗滌，下同）。

　　2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。（同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔）。

　　3.　加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。

　　4.　加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。

　　5.　終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。

　　6.　結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽(yáng)性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+"、“-"號(hào)表示。也可測(cè)O•D值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔O•D值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽(yáng)性。

　　方法二　用于檢測(cè)未知抗體的間接法：　　　

　　用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg／ml，每孔加0.1ml，4℃過夜。次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。（同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照）于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體（抗抗體）0.1ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法"的4、5、6。

相關(guān)產(chǎn)品： 

人*Ⅷ（FⅧ）ELISA試劑盒 Human coagulation factor Ⅷ FⅧ ELISA Kit

人糖連抗原22（CA22）ELISA試劑盒 Human CA50 ELISA Kit

人糖鏈抗原242（CA242）ELISA試劑盒 Human CA242 ELISA Kit

人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2（VEGFR2）ELISA試劑盒 Human Vascular endothelial growth factor receptor 2 VEGFR2 ELISA Kit

人腫瘤壞死因子超家族15（TL1A/TNFSF15）ELISA試劑盒 Human TL1A/TNFSF15 TL1A/TNFSF15 ELISA Kit

人瘦素（LEP）ELISA試劑盒 Human Leptin,LEP ELISA kit

人白介素2受體（IL-2R）ELISA試劑盒 Human Interleukin-2 receptor,IL-2R ELISA kit

人可溶性Endoglin（ENG/sCD105）ELISA試劑盒 Human Soluble Endoglin,ENG/sCD105 ELISA Kit