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當(dāng)前位置:上海誠凜生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>*細(xì)胞消化液(2.5%)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
*(Trypsin)是由胰臟產(chǎn)生沒有活性的*原分泌到小腸后,小腸內(nèi)的腸肽酶會(huì)活化該酶原,形成*。*的特點(diǎn)在于已經(jīng)活化的*,能夠繼續(xù)活化更多*原,這種過程即自動(dòng)催化。*在小腸工作,它會(huì)將蛋白質(zhì)水解為肽,進(jìn)而分解為氨基酸,其zui適溫度約為37℃。 主要由2.5%*組成,經(jīng)過濾除菌。本試劑可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞的消化,或者一些組織的消化,通常室溫1min 左右就可以消化下大多數(shù)貼壁細(xì)胞。該溶液濃度較高,可以稀釋到相應(yīng)濃度后使用。
產(chǎn)品組成:
Trypsin solution(2.5%) 100ml -20℃
使用說明書 1 份
自備材料:
1、 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液
2、 顯微鏡
3、 離心機(jī)
操作步驟(僅供參考):
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌的PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血
清。
②加入少量Trypsin solution或用無菌水配制成適合濃度,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置0.5~
2min,不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,此時(shí)吸除*細(xì)胞消化液。加入含血
清的*細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入Trypsin solution 工作液重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落,
直接用*細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心1min,沉淀細(xì)胞,盡量
去除*細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化
不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
注意事項(xiàng):
1、 盡量減少反復(fù)凍融的次數(shù),以免失效。
2、 在使用*細(xì)胞消化液的過程中要特別注意避免消化液被細(xì)菌污染。
3、 *細(xì)胞消化液消化細(xì)胞時(shí)間不宜過長,否則細(xì)胞鋪板后生長狀況會(huì)較差。
4、 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
有效期: 12 個(gè)月有效。
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