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當(dāng)前位置:上海必泰生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>如何為每個樣品選擇適當(dāng)?shù)倪^濾材料?
在常規(guī)的樣品過濾中,過濾器材料的相容性往往被忽視。研究人員可能經(jīng)常根據(jù)便利性來選擇濾紙或設(shè)備,并且僅在發(fā)生錯誤或在排查意外結(jié)果原因時才會重新考慮。
可供選擇的濾膜材料有多種,包括玻璃或天然聚合物和合成聚合物,每種材料都具有好的特性,幾乎能夠與任何樣品相容。
了解這些特性,并采用預(yù)防性而非應(yīng)對性方法來處理過濾和膜與樣品相容性問題,可以最大限度地減少故障排查時間并最大限度地提高過濾效率。
親水膜和疏水膜之間的差異
疏水膜(例如聚四氟乙烯 (PTFE))會排斥任何水性樣品,從而產(chǎn)生背壓。雖然有時可以通過施加其他力來克服此背壓,但存在膜破裂和過濾不wan全的風(fēng)險(xiǎn)。
如果沒有其他選擇,可以使用酒精預(yù)先將膜濕潤,這樣可以減少這種背壓影響。
PTFE 和其他疏水性材料非常適合有機(jī)樣品和溶劑,它們不會產(chǎn)生阻力或背壓。但是,一些有機(jī)溶劑會被吸收到膜材料中,特別是在長時間接觸后。
這種吸收會使材料膨脹,使孔徑縮小,進(jìn)而影響過濾器的性能。還有某些溶劑可能對材料產(chǎn)生化學(xué)腐蝕,導(dǎo)致提取物被釋放到濾液中。在極少數(shù)情況下,溶劑可能會使膜部分或溶解,從而導(dǎo)致樣品穿透和造成污染。
就大多數(shù)膜材料而言,水性樣品損壞膜材料的可能性較小,尤其是親水性材料。但 pH 值是決定膜相容性的一個重要因素。
強(qiáng)酸性或強(qiáng)堿性溶劑可能不會立即對膜造成損壞,但隨著時間的推移會對膜產(chǎn)生影響。因此,只有高惰性膜(例如 PTFE)才適合高 pH 和低 pH 的樣品。
深層過濾
就顆粒截留而言,過濾器分為兩類:表面過濾器和深層過濾器。表面過濾器通常被稱為膜,只在上表面截留顆粒。這些過濾器非常適合顆粒含量較低的樣品。如果顆粒含量較高,很可能導(dǎo)致過濾器表面迅速堵塞。
將顆粒含量較高的樣品推入表面過濾器(例如徑跡刻蝕聚酯)可能會導(dǎo)致形成背壓,并可能在足夠大的力下造成穿透。而深層過濾器則非常適合用于顆粒含量較高的應(yīng)用,可將顆粒截留在其纖維基質(zhì)中。
由聚醚砜 (PES) 等材料制成的非對稱深層過濾器的頂部具有開放式基質(zhì)結(jié)構(gòu),底部采用更精細(xì)的基質(zhì)結(jié)構(gòu)。這種孔隙率梯度設(shè)計(jì)可首先截留大顆粒,然后作為下方較濃密材料的預(yù)過濾器,并保持物質(zhì)流動性。
對于較難過濾的顆粒含量較高的樣品(例如土壤樣品),無紡布基質(zhì)過濾器可提供大容量的精細(xì)過濾。例如,無紡布聚丙烯 (NWPP) 可提供針對顆粒的持久大容量過濾能力。
這些無紡布基質(zhì)通常是具有分層結(jié)構(gòu)的厚墊,可大程度減少堵塞。無紡布基質(zhì)過濾器的其他材料選擇包括玻璃纖維和纖維素。
蛋白質(zhì)結(jié)合和樣品提取物
除阻力和堵塞問題外,膜與樣品的相容性也會影響濾液的成分。如果不相容性,在此處可能導(dǎo)致樣品溶質(zhì)被過濾器意外截留(蛋白質(zhì)結(jié)合)或不需要的溶質(zhì)經(jīng)由過濾器材料或外殼被釋放到樣品中(提取物)。
某些親水性材料,例如尼龍 (NYL) 和硝酸纖維素 (CN),有較高的蛋白質(zhì)結(jié)合能力。這種特性使其不適合蛋白質(zhì)回收和分析,如果使用則可能導(dǎo)致不一致或意外的結(jié)果。
而再生纖維素 (RC) 和醋酸纖維素 (CA) 幾乎不與任何蛋白質(zhì)結(jié)合,因此非常適合過濾含蛋白質(zhì)的溶液。此外,RC 還具有廣泛的溶劑相容性。在結(jié)合使用 PTFE 的情況下,RC 可充當(dāng)一種通用材料,且非常實(shí)用。
可提取物是一種常見的指示膜與樣品不相容的現(xiàn)象,會影響敏感的下游分析技術(shù),例如超高效液相色譜 (UHPLC) 和高效液相色譜 (HPLC)。PTFE、聚偏二氟乙烯 (PVDF) 以及 RC 與 HPLC 中常用的多種溶劑相容,且產(chǎn)生的提取物含量較低。
我們編制了相容性表,其中列出了材料對常見溶劑的耐受性,可用于快速參考。根據(jù)相容性選擇過濾材料,可最大限度降低過濾緩慢或無效、提取物導(dǎo)致樣品受到污染的可能性,并最大限度提高過濾效率。
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