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當(dāng)前位置:上海必泰生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>GE Whatman濾紙在牙科口腔科領(lǐng)域的應(yīng)用
1、齦溝液(GCF)的收集及處理分別預(yù)備4 條2 mm×10 mm 3MM 濾紙條(Whatman,英國)放入已編號的Eppendorf 管中,取樣前半小時用AE 240 電子天平
稱重并記錄。受試者漱口、隔濕取樣牙,去除齦上菌斑和牙石,輕輕吹干牙面。每顆牙4 個取液區(qū),將濾紙條插入唇舌側(cè)(中央)和近遠(yuǎn)中(從唇側(cè)斜向插入)
齦溝中,直至遇到輕微阻力為止,30 s 后取出,立即放回原Eppendorf 管中。若被唾液或者血液污染則重取。再次用電子天平稱重,兩者之差即為GCF 的
質(zhì)量。稱重后將Eppendorf 管封口,放入低溫冰箱內(nèi),-70 ℃保存。樣本測試前解凍,按所得差值用去離子水稀釋100 倍后,以13 000 r /min 低溫離心20
min,取上清液備測。
2、比較whatman3MM層析濾紙和whatman3#定性濾紙在收集齦溝液及蛋白萃取方面的性能,為臨床研究中選用合適濾紙采集齦溝液提供實驗依據(jù)。方法:A組用whatman3MM層析濾紙,B組用whatman3#定性濾紙,手工裁剪成2mm×8mm大小的濾紙條。2組分別加入15個體積遞增的血清品紅溶液,同體積重復(fù)4次,測量每張濾紙條上的溶液浸潤長度。2組分別加入5個體積遞增的正常人血清,同體積重復(fù)5次,測定各組萃取液的總蛋白濃度;A、B 2組分別加入用0.9%NaCl溶液等倍稀釋獲得的5種濃度的正常人血清溶液1μL,同濃度重復(fù)5次,測定各組萃取液的總蛋白濃度。使用SPSS17.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析,比較兩者差異。結(jié)果:2組溶液浸潤長度與溶液體積均呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系,差異有顯著性(P0.05)。除體積為0.1μL時,A組濾紙條上的溶液平均浸潤長度均大于B組。蛋白萃取性能比較中,2組無顯著性差異(P0.05)。結(jié)論:2種濾紙均可對齦溝液在濾紙條上的遷移距離及其所采集的齦溝液進(jìn)行定量。當(dāng)齦溝液分泌量較大時,whatman3#定性濾紙較3MM層析濾紙更為適用。兩者的蛋白萃取性能無顯著差異。
3、牙周袋臨床指標(biāo)和齦溝液的測定: 由同一名醫(yī)師完成術(shù)前、術(shù)后的每次臨床檢查,用標(biāo)準(zhǔn)刻度探針測定牙周袋深度,所有探診檢查均使用Michigan 探診,牙周袋深度取測定牙的頰側(cè)近中、中央、遠(yuǎn)中及舌側(cè)中央的牙周袋深度均值,在隔濕,吹干后用Whatman 號濾紙制成2 mm ×20 mm 的濾紙條插入牙周袋內(nèi)2 min ,取出后用游標(biāo)卡尺測量其浸潤面積,換算成齦溝液量。
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