移液器在臨床實驗室中因為基本結(jié)構(gòu)簡單,使用方便等原因而得到廣泛應(yīng)用。其基本結(jié)構(gòu)主要有顯示窗、容量調(diào)節(jié)部件、活塞、0-形環(huán)、吸引管和吸頭(吸液嘴)等幾個部分
工作原理
臨床常用的微量移液器的設(shè)計依據(jù)是胡克定律:即在一定限度內(nèi)彈簧伸展的長力與彈力成正比,也就是移液器內(nèi)的液體體積與移液器內(nèi)的彈簧彈力成正比。
微量移液器加樣的物理學(xué)原理有兩種:使用空氣墊加樣和使用無空氣墊的活塞正移動(positivedisplacement)加樣。這兩種不同原理的微量移液器有其不同的特定應(yīng)用范圍
常見分類
根據(jù)工作原理可分為空氣置換移液器與正向置換移液器;
根據(jù)能夠同時安裝吸頭的數(shù)量可將其分為單通道移液器和多通道移液器;
根據(jù)刻度是否可調(diào)節(jié)可將其分為固定移液器和可調(diào)節(jié)式移液器;
根據(jù)調(diào)節(jié)刻度方式可將其分為手動式移液器和電動式移液器;
根據(jù)特殊用途可將其分為全消毒移液器、大容量移液器、瓶口移液器、連續(xù)注射移液器等
臨床應(yīng)用
臨床診斷實驗室,生物技術(shù)實驗室, 藥學(xué)和化學(xué)實驗室,環(huán)境實驗室,食品實驗室
使用方法
1.選擇合適的移液器
移取標(biāo)準(zhǔn)溶液(如水、緩沖液、稀釋的鹽溶液和酸堿溶液)時多使用空氣置換移液器,移取具有高揮發(fā)性、高黏稠度以及密度大于2.0g/cm的液體或者在臨床聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)測定中的加樣時使用正向置換移液器。如移取15ul的液體,最好選擇最大量程為20ul的移液器,選擇50ul及其以上量程的移液器都不夠準(zhǔn)確。
2.設(shè)定移液體積
調(diào)節(jié)移液器的移液體積控制旋鈕進(jìn)行移液量的設(shè)定。調(diào)節(jié)移液量時,應(yīng)視體積大小而旋轉(zhuǎn)刻度至超過設(shè)定體積的刻度,再回調(diào)至設(shè)定體積,以保證移取的最佳精確度。
3.裝配吸頭
使用單通道移液器時,將可調(diào)式移液器的嘴錐對準(zhǔn)吸頭管口,輕輕用力垂直下壓使之裝緊。使用多通道移液器時,將移液器的第一排對準(zhǔn)第一個管嘴,傾斜插入,前后稍微搖動擰緊。
4.移液
保證移液器、吸頭和待移取液體處于同一溫度;然后用待移取吸液體潤洗吸頭1-2次,尤其是黏稠的液體或密度與水不同的液體。移取液體時,將吸頭尖垂直浸入液面以下2-3mm深度(嚴(yán)禁將吸頭全部插入溶液中),緩慢均勻地松開操作桿,待吸頭吸入溶液后靜置2-3秒,并斜貼在容器壁上淌走吸頭外壁多余的液體。
5. 移液器的放置
使用移液器完畢后,用大拇指按住吸頭推桿向下壓,安全退出吸頭后將其容量調(diào)到標(biāo)識的最大值,然后將移液器懸掛在專用的移液器架上;長期不用時應(yīng)置于專用盒內(nèi)
移取方法
前進(jìn)移液法按下移液操作桿至第一停點(diǎn)位置,然后緩慢松開按鈕回原點(diǎn);接著將移液操作桿按至第一停點(diǎn)位置排出液體,稍停片刻繼續(xù)將移液操作桿按至二停點(diǎn)位置排出殘余液體,最后緩慢松開移液操作桿。
反向移液法先按下按鈕至第二停點(diǎn)位置,慢慢松開移液操作桿回原點(diǎn),排出液體時將移液操作桿按至第一停點(diǎn)位置排出設(shè)置好體積的液體,繼續(xù)保持按住移液操作桿位于第一停點(diǎn)位置取下有殘留液體的吸頭而棄之。
注意事項
在調(diào)節(jié)移液器的過程中,轉(zhuǎn)動旋鈕不可太快,也不能超出其最大或最小量程,否則易導(dǎo)致量不準(zhǔn)確,并且易卡住內(nèi)部機(jī)械裝置而損壞移液器。
在裝配吸頭的過程中,用移液器反復(fù)強(qiáng)烈撞擊吸頭反而會擰不緊,長期如此操作,會導(dǎo)致移液器中零件松散,嚴(yán)重時會導(dǎo)致調(diào)節(jié)刻度的旋鈕卡住。
當(dāng)移液器吸頭里有液體時,切勿將移液器水平放置或倒置,以免液體倒流而腐蝕活塞彈簧。
對移液器進(jìn)行高溫消毒時,應(yīng)首先查閱所使用的移液器是否適合高溫消毒后在進(jìn)行處理。
維護(hù)保養(yǎng)
移液器應(yīng)根據(jù)使用頻率進(jìn)行定期維護(hù),但至少每隔3個月維護(hù)一次,檢查移液器是否有灰塵和污物,尤其注意其嘴錐部位。長期維護(hù)時需要清潔移液器內(nèi)部,必須由經(jīng)培訓(xùn)合格的人員拆卸。
1.移液器的清潔
內(nèi)部的清潔需要先拆卸移液器下半部分,拆卸下來的部件用肥皂水、洗潔精或60%異丙醇來擦洗,再用雙蒸水沖洗,晾干,再在活塞表面用棉簽涂上一層薄薄的起潤滑作用的硅樹脂;密封圈一般無需清洗。
2.移液器的消毒
可采用常規(guī)高溫高壓滅菌處理或紫外線照射滅菌進(jìn)行消毒。
3.移液器上污染核酸的去除
將移液器下半部分拆卸下來的內(nèi)、外套筒,在95℃清洗液中浸泡30分鐘,再用雙蒸水將套筒沖洗干凈,60℃下烘干或*晾干,最后在活塞表面涂上潤滑劑(硅樹脂)并將部件組裝。
選擇標(biāo)準(zhǔn)
性能:準(zhǔn)確性和重復(fù)性
耐用性/維護(hù):移液器使用壽命長,僅需要很少的維護(hù)或維護(hù)成本低
符合人體工程學(xué)原理: 手感舒適,吸排液操作力輕,避免重復(fù)性肌勞損,退吸頭力小
選擇具有廠商資質(zhì)售后服務(wù)的品牌。
常見移液器
微量移液器
微量移液器是生物\化學(xué)實驗室常用的小容量移取液體的單道微量移液器。
外置活塞移液器
由于蒸汽壓,密度,黏度不同,在吸取一些高黏度的物質(zhì)時,如油脂,蛋白等,無法吸取。外置活塞移液器卻能勝任。
具有與單道空氣活塞式移液器一樣準(zhǔn)確的精度和誤差系數(shù)。
可以適用于高黏度液體,如蛋白,樹脂,最高黏度可達(dá)50,000mm2/s,最高密度可達(dá)13.6g/cm3 ,如汞等;高蒸汽壓的液體,最高蒸汽壓可達(dá)500mbar,無論酒精還是一些碳?xì)浠衔?,都能輕松移取。發(fā)泡性液體的移取也毫無問題。
瓶口移液器
根據(jù)型號不同,通常用于中等流量(0.5ml-100ml)的液體的運(yùn)輸,如酸,堿等,根據(jù)吸取的液體的性質(zhì)不同分為Dispensette III, Dispensette Organic 和Dispensette HF ??梢哉w于121℃中消毒。
手動連續(xù)移液器
可以迅速而方便地完成連續(xù)移液工作,可以輕松完成2ul-5000ul的試劑。一次吸液完成49次之多。對于粘稠,高密度液體和高蒸汽壓液體同樣可以準(zhǔn)確移取。適用 于Plastibrand PD吸頭,Combitips吸頭以及其他活塞式吸頭。
電子連續(xù)移液器
利用微處理器控制操作可達(dá)到自動識別特定的PD-吸頭
移液體積控制范圍從1ul-50ml,移動7.01ul,70.1ul等將毫無問題。
自動分配,電子連續(xù)移液器可根據(jù)連續(xù)三次移液的平均間隔時間,然后進(jìn)行分液。(所需時間可自動計算,不需人工計算和輸入)。
智能充電,可直接將電子連續(xù)移液器插入充電器進(jìn)行充電,也可將電池取下進(jìn)行充電。更換備用電池時,原儲存數(shù)據(jù)不會因短電而丟失。
電子滴定器
常用于食品,制藥,石油化工等行業(yè)。
體積小,電池壽命長,適合于狹小空間和遠(yuǎn)離電源的地方使用。操作簡便,吸入試劑時,按“Fill"鍵,手輪向上旋動,如開始滴定,按“Titr"鍵開始,手輪向下旋動,即開始顯示滴定體積。數(shù)字顯示,減少了人為讀數(shù)和計算體積時所帶來的誤差。無需工具,用戶可自行校準(zhǔn)。
移液器校準(zhǔn)
清潔后的移液器需要校準(zhǔn)。移液器校準(zhǔn)時必須在室溫條件(25+/-2℃)下進(jìn)行。參照移液器的使用說明,不同刻度10000\5000\1000\200ul必須分別進(jìn)行校準(zhǔn)。
將移液頭里的氣泡排除,選擇好需要校準(zhǔn)的刻度。
將一空容器放在精度為0.1 毫克的電子天平上去皮。
按加液鍵,將水加入空容器中稱重,記錄讀數(shù)。
按照國標(biāo),移液器的校準(zhǔn)采用“三點(diǎn)測試(最大量程的100%,50%和10%),每點(diǎn)六次"的規(guī)則,而供應(yīng)商通常會選擇兩種規(guī)則:一是簡易校準(zhǔn),也就是兩點(diǎn)測試(最大量程的100%和10%),每點(diǎn)四次;二是嚴(yán)格校準(zhǔn),也就是三點(diǎn)測試(最大量程的100%,50%和10%),每點(diǎn)十次。使用者根據(jù)自己的實際需求選擇一種規(guī)則完成測試后即進(jìn)入計算環(huán)節(jié)。(根據(jù)平均值與實際值間的絕對差值進(jìn)行調(diào)節(jié),用工具來擰彈簧卡扣的松緊)