您好, 歡迎來到環(huán)保在線! 登錄| 免費注冊| 產(chǎn)品展廳| 收藏商鋪|
行業(yè)產(chǎn)品
提供商
齊一生物科技(上海)有限公司資料大小
23.3KB資料圖片
下載次數(shù)
34次資料類型
PNG 圖片瀏覽次數(shù)
131次人彈性蛋白微原纖維界面因子2(EMILIN2)劑盒酶法需要自備的試劑和器材:
1.37℃恒溫箱。
2.標準規(guī)格酶標儀。
3.精密移液器及一次性吸頭
4.蒸餾水,
5.一次性試管
6.吸水紙
人彈性蛋白微原纖維界面因子2(EMILIN2)劑盒酶法操作步驟:
1、標準品的稀釋:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在*、第二孔中分別加標準品100μl,然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為9mmol/L,6 mmol/L,3 mmol/L,1.5mmol/L, 0.75 mmol/L)。
2、加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3、溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4、配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6、加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7、溫育:操作同3。
8、洗滌:操作同5。
9、顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10、終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11、測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
洗板方法:
手工洗板方法:甩掉酶標板內的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將稀釋后的洗滌液至少0.35ml注入孔內,浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要,重復此過程數(shù)次。
自動洗板:如果有自動洗板機,應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
注意事項:
試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數(shù)量多,使用排槍加樣。
請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
底物請避光保存。
嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
本試劑不同批號組分不得混用。
如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
計算:
以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,
在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD
值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋
倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標
準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值
代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋
倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
檢測范圍、 OD值:
具體請咨詢在線客服,或者來電索要詳細說明書!
人彈性蛋白微原纖維界面因子2(EMILIN2)劑盒酶法
齊一生物科技(上海)有限公司主要經(jīng)營進口原裝Elisa試劑盒,自產(chǎn)品牌QIYBO試劑盒,種類齊全,價格實惠,凡購買我公司產(chǎn)品的新老客戶,即可享免費代測實驗服務,可檢測人源,小鼠,大鼠,豬,狗,猴,兔,羊,雞,牛,鴨子,魚,植物,昆蟲等各種種屬樣本。全程提供。如需其他Elisa試劑盒說明書及報價,可我公司!
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業(yè)負責,環(huán)保在線對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風險,建議您在購買產(chǎn)品前務必確認供應商資質及產(chǎn)品質量。