玻璃奶DNA快速純化回收試劑盒■ 產(chǎn)品簡(jiǎn)介

利用特殊玻璃微珠吸附DNA的特性,可快速、高效地純化、回收 DNA。與傳統(tǒng)的低熔點(diǎn)瓊脂糖和PEG回收DNA方法相比, 此試劑盒有以下特點(diǎn)：

快速：整個(gè)操作過程可在30-45分鐘內(nèi)完成。

高效：常規(guī)操作, 回收率zui高可達(dá)80%左右。

高純：不含鹽、蛋白質(zhì)、RNA等雜質(zhì), 純度與CsCl密度梯度離心相仿。

廣泛：可以回收100bp-20,000bp的DNA片段。

     100bp       DNA片段的回收率>60%

     200bp-20Kb  DNA片段的回收率可達(dá)70%-80%

     20Kb以上    DNA片段回收率可達(dá)50％  

多樣：可以回收單鏈、雙鏈DNA片段以及環(huán)狀質(zhì)粒DNA。

簡(jiǎn)便：僅在單個(gè)Eppendorf管中操作, 易于掌握。

安全：不接觸酚、氯仿等有害物質(zhì)。

歡迎廣大客戶咨詢，齊一生物： 程 . . .

玻璃奶DNA快速純化回收試劑盒規(guī)格
玻璃奶  3ml 
溶膠液  120ml 
漂洗液W2  3×15ml 
洗脫緩沖液TE   15ml 
說明書  1 份 
 選配試劑： 
3M乙酸鈉（pH 5.2）
儲(chǔ)存條件： 
本試劑盒在室溫（15–25℃）干燥條件下，可保存12個(gè)月；更長(zhǎng)
時(shí)間的保存可置于2–8℃。（注意：當(dāng)?shù)蜏刭A存時(shí)，使用前應(yīng)先將試劑
盒內(nèi)的溶液在室溫中放置一段時(shí)間，必要時(shí)可在 37℃水浴中預(yù)熱 10
分鐘，以平衡溶液溫度）。玻璃奶應(yīng)儲(chǔ)存在-20℃，防止沉淀，可反復(fù)
凍融。 
規(guī)格  
產(chǎn)品簡(jiǎn)介： 
利用特殊玻璃微珠吸附DNA的特性, 可快速、高效地純化、回收 
DNA。與傳統(tǒng)的低熔點(diǎn)瓊脂糖和PEG回收DNA方法相比, 此試劑盒有以
下特點(diǎn)： 
 快速：整個(gè)操作過程可在30-45分鐘內(nèi)完成。 
 高效：常規(guī)操作, 回收率zui高可達(dá)80%左右。 
 高純：不含鹽、蛋白質(zhì)、RNA等雜質(zhì), 純度與CsCl密度梯度離心 
相仿。 
 廣泛：可以回收100bp-20,000bp的DNA片段。 
                      100bp              DNA片段的回收率>60% 
                              200bp-20Kb    DNA片段的回收率可達(dá)70%-80% 
                              20Kb以上       DNA片段回收率可達(dá)50％     
 多樣：可以回收單鏈、雙鏈DNA片段以及環(huán)狀質(zhì)粒DNA。 
 簡(jiǎn)便：僅在單個(gè)Eppendorf管中操作, 易于掌握。 
 安全：不接觸酚、氯仿等有害物質(zhì)。               
規(guī)格注意事項(xiàng)：請(qǐng)務(wù)必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項(xiàng)。 
1   溶膠液中含有 pH 指示劑，為黃色時(shí)，指示 pH≤7.5。若實(shí)驗(yàn)過程
中溶液顏色發(fā)生變化，請(qǐng)使用 5-10µl  3M 乙酸鈉（pH  5.2）將溶
液的顏色調(diào)為黃色后再進(jìn)行后續(xù)操作。（溶膠液中含有pH指示劑，
當(dāng) pH≤7.5 時(shí)溶液的顏色為黃色，此時(shí) DNA 才能夠*有效的與
膜結(jié)合，當(dāng) pH 值偏高時(shí)溶液的顏色變?yōu)榻奂t色和紫色，需要進(jìn)行
調(diào)整。） 
2   使用之前請(qǐng)按照瓶體標(biāo)簽提示在漂洗液W2中加入無水乙醇。 
3. 玻璃奶在使用前務(wù)必混勻；特別是有沉淀產(chǎn)生時(shí)，應(yīng)振蕩或吹打至
沉淀消失。 
 
規(guī)格操作步驟： 
 一、從普通瓊脂糖凝膠中回收DNA片段 
1. 待回收的DNA片段經(jīng)電泳分離后, 從瓊脂糖凝膠上切下所需DNA 
片段, 放在1.5ml Eppendorf管中。                           
2. 加入2倍(請(qǐng)準(zhǔn)確估量凝膠的體積!)體積的溶膠液(如果凝膠重為0.1 
g，其體積可視為100  µl,則加入200µl溶膠液),  55℃保溫6-10分鐘, 
其間輕搖Eppendorf管幾次使膠*溶化。 
注意：標(biāo)準(zhǔn)是1%的膠，如果是2%的膠則加入4倍體積溶膠液。 
3. 加入10µl玻璃奶(玻璃奶使用前請(qǐng)充分混勻!), 渦旋振蕩1-2秒, 冰浴
下放置10分鐘；其間每隔2-3分鐘混勻一次！12,000rpm離心30秒，
吸棄上清。 
注意：充分振蕩混勻，有助于玻璃奶分散開，增大吸附面積，提高得率，但對(duì)
大于15k以上的片段有少量的剪切。建議先按我們提供的振蕩1-2s操作，如果
剪切程度過大，產(chǎn)物不適合您的后續(xù)實(shí)驗(yàn)，再做適當(dāng)調(diào)整。 
4. 加250µl漂洗液W2（請(qǐng)檢查是否按瓶體標(biāo)簽提示加入無水乙醇）,   
用加樣器吹打漂洗液, 輕柔地將玻璃奶懸浮混勻, 12,000rpm離心 
30秒, 吸棄上清。 
5. 重復(fù)步驟4(盡量吸盡漂洗液!)。吸取完漂洗液后再離心10秒鐘, 
     用10ul Tip頭將zui后一點(diǎn)兒漂洗液吸干凈。然后, 放置于37℃溫箱干 
燥15-20分鐘(如果未干, 可適當(dāng)延長(zhǎng)干燥時(shí)間! 特別提示:客戶也 
可選擇50℃的烘箱來干燥玻璃奶,5-10分鐘即可,這樣可以節(jié)省實(shí) 
驗(yàn)的時(shí)間,整個(gè)實(shí)驗(yàn)約半小時(shí)即能完成)。                                                  
   
6. 加適量洗脫緩沖液TE或無菌蒸餾水或TE(常規(guī)加入20µl), 混勻, 
      60℃水浴5分鐘, 12,000rpm離心1分鐘, 回收上清備用。重復(fù)步 
驟6, 能提高回收率。 
 
 二.從溶液中純化回收DNA片段                           
    1. 在DNA溶液中加入2倍體積的溶膠液和10µl玻璃奶, 振蕩混勻, 
室溫下放置5分鐘。 
    2. 其余步驟同上。 
                                                           
附錄： 【優(yōu)化的PCR 產(chǎn)物克隆連接反應(yīng)】 
 連接反應(yīng)實(shí)驗(yàn)步驟： 
  1). 50µl PCR反應(yīng)產(chǎn)物中加入1µl Klenow 酶(約2-5個(gè)單位),   
于37℃放置半個(gè)小時(shí)。   
  2). 采用〖DNA快速純化回收試劑盒(玻璃奶法)〗回收所需的DNA 
片段。 
  3). 在10 µl反應(yīng)體系中分別加入：載體pUC18/SmaI 1µl (0.1µg)、
所需插入的外源DNA片段6µl(與載體的摩爾數(shù)比約為3比1,或10 
比1 ,甚至更高)、50% PEG8000 1µl、10X連接緩沖液  1µl、T4   
DNA連接酶1µl(約1-5個(gè)單位)。 
  4). 于16℃放置過夜(>12小時(shí)), 隨后即可做轉(zhuǎn)化反應(yīng)。 

歡迎廣大客戶咨詢，齊一生物： 程 . . .