人胚肺成纖維細(xì)胞 MRC-5細(xì)胞
細(xì)胞中無機鹽的含量很少,約占細(xì)胞總重的1%。鹽在細(xì)胞中解離為離子,離子的濃度除了具有調(diào)節(jié)滲透壓和維持酸堿平衡的作用外,還有許多重要的作用。主要的陰離子有Cl-、PO4-和HCO3-,其中磷酸根離子在細(xì)胞代謝活動中zui為重要:
①在各類細(xì)胞的能量代謝中起著關(guān)鍵作用;
②是核苷酸、磷脂、磷蛋白和磷酸化糖的組成成分;
③調(diào)節(jié)酸堿平衡,對血液和組織液pH起緩沖作用。
人胚肺成纖維細(xì)胞 MRC-5細(xì)胞
大鼠主動脈血管平滑肌細(xì)胞) A10細(xì)胞 CRL-1476
小鼠脂肪細(xì)胞) 3T3-L1細(xì)胞 CL-173
皮下結(jié)締組織細(xì)胞) A9細(xì)胞 CRL-1811
B淋巴細(xì)胞 ) WEHI 22.1細(xì)胞 TIB-54
胚胎成纖維細(xì)胞) NIH/3T3細(xì)胞 CRL-1658
小鼠原成骨細(xì)胞) MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞 CRL-2594
大鼠成肌細(xì)胞 ) L6細(xì)胞 CRL-1458
2-1大鼠心肌細(xì)胞 H9c2細(xì)胞 CRL-1446
大鼠雪旺細(xì)胞) RSC96細(xì)胞 CRL-2765
中國倉鼠二氫*還原酶缺陷細(xì)胞) CHO/dhFr-細(xì)胞 CRL-9096
卵巢細(xì)胞) Lec1細(xì)胞 CRL-1735
人胚腎細(xì)胞) 293T/17 [HEK 293T/17] 細(xì)胞 CRL-11268
胚腎細(xì)胞 ) AAV-293細(xì)胞 //
SV40 轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞) hFOB 1.19細(xì)胞 CRL-11372
皮膚細(xì)胞 ) CCD-1095Sk細(xì)胞 CRL-2122
乳腺細(xì)胞) Hs 578Bst細(xì)胞 HTB-125
【研究范圍】僅供科研使用
【細(xì)胞特征】每兩到三天進(jìn)行換液。細(xì)胞應(yīng)當(dāng)在融合前傳代
【細(xì)胞培養(yǎng)表述】
一、態(tài)觀察。細(xì)胞膜是每天必須觀察的,看是否清晰,細(xì)胞的死亡往往是從細(xì)胞膜的破裂開始的,早期的表現(xiàn)就是細(xì)胞膜某一點出現(xiàn)欠完整或者毛發(fā)影。
二、細(xì)胞往往會有“抱團”現(xiàn)象,抱團生長或死亡,個人認(rèn)為應(yīng)該勤換液或傳代,盡量避免細(xì)胞抱團。
三、長迅速,強烈建議用較大的培養(yǎng)瓶養(yǎng),用小瓶養(yǎng)的話,換液不及時,很容易死亡。細(xì)胞的生長速度一般為2天左右就需要傳代,并且一般為一傳三,或一傳四。
四、培養(yǎng)液:1640培養(yǎng)液,1L一般加*2g,并加雙抗,胎牛血清濃度*為12%,zui低不低于10%,細(xì)胞對胎牛血清高度依賴。培養(yǎng)液PH應(yīng)調(diào)為7.20-7.40之間。
五、防污染。細(xì)胞生長迅速,較少發(fā)生污染,但常規(guī)措施應(yīng)該做好。比如無菌操作,酒精消毒等,培養(yǎng)瓶口建議過火,包括瓶蓋,應(yīng)過火4秒左右。
六、凍存。-20一小時,-80過夜,液氮*保存。強烈建議液氮*保存,盡量不要在-80*保存,死亡率很高。
七、復(fù)蘇。調(diào)節(jié)水浴箱溫度為42℃,并提前在試管內(nèi)放置10倍培養(yǎng)液,使培養(yǎng)液溫度與室溫*。1分鐘內(nèi)融化細(xì)胞(禁止搖晃凍存管),移取至試管內(nèi),動作要輕,從試管管底開始慢慢上提移液管,使細(xì)胞在培養(yǎng)液內(nèi)分布均勻,離心,洗2次。