試劑盒名稱:人E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)elisa試劑盒
規(guī) 格:48T
產(chǎn)品的用途:僅供科研ELISA檢測試劑盒
檢測的原理:采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。
標本的處理:
(1)細胞培養(yǎng)上清液
根據(jù)需要用試劑盒中的標準稀釋液稀釋樣品,然后按照說明書所述方法檢測。*稀釋濃度是稀釋5倍。
(2)腦脊液
根據(jù)需要用試劑盒中的標準稀釋液稀釋樣品,然后按照說明書所述方法檢測。*稀釋濃度是5倍。
(3)血漿
①用EDTA2K離心收集在真空血液收集管中的血液,5,000×g,15分鐘,4℃,分離血漿樣品,然后儲存在零下80℃直到使用。
②用試劑盒中的標準稀釋液5倍稀釋血漿以避免血漿中的干擾物質(zhì)影響檢測,按照說明書方法檢測。
人E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)elisa試劑盒實驗過程中酶標比色儀的使用
酶標比色儀簡稱酶標儀,通常指于測讀ELISA結(jié)果吸光度的光度計。針對固相載體形式的不同,各有特制的適用于板、珠和小試管的設計。許多試劑公司配套供應酶標儀。酶標儀的主要性能指標有:測讀速度、讀數(shù)的準確性、重復性、精確度和可測范圍、線性等等。優(yōu)良的酶標儀的讀數(shù)一般可精確到0.001,準確性為±1%,重復性達0.5%。舉例說,若某孔測得的A值為1.083,則該孔相對于空氣的真實A值應為1.083±0.01(1.073~1.093),重復測定數(shù)次,其A值均應1.083±0.05(1.078~1.088)在之間。酶標儀的可測范圍視各酶標儀的性能而不同。普通的酶標儀在0.000~2.000,新型號的酶標儀上限拓寬達2.900,甚至更高。超出可測上限的A值常以"*"或"over"或其它符號表示。應注意可測范圍與線性范圍的不同,線性范圍常小于可測范圍,比如某一酶標儀的可測范圍為0.000~2.900,而其線性范圍僅0.000~2.000,這在定量ELISA中制作標準曲線時應予注意。
酶標儀不應安置在陽光或強光照射下,操作時室溫宜在15~30℃,使用前先預熱儀器15-30分鐘,測讀結(jié)果更穩(wěn)定。
測讀A值時,要選用產(chǎn)物的敏感吸收峰,如OPD用492nm波長。有的酶標儀可用雙波長式測讀,即每孔先后測讀兩次,*次在zui適波長(W1),第二次在不敏感波長(W2),兩次測定間不移動ELISA板的位置。例如OPD用492nm為W1,630nm為W2,zui終測得的A值為兩者之差(W1-W2)。雙波長式測讀可減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
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