中文名稱:小鼠泛素蛋白elisa試劑盒
英文名稱:Mouse Ubiquitin,Ub elisa Kit
性狀:液體
保存:2-8℃
公司服務(wù):elisa實(shí)驗(yàn)外包,elisa技術(shù)指導(dǎo),操作指導(dǎo),elisa試劑盒代做實(shí)驗(yàn),代做
題等技術(shù)服務(wù)
保質(zhì)期:6個(gè)月
運(yùn)輸:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運(yùn)輸方式)
小鼠泛素蛋白elisa試劑盒需要而未提供的材料及配制:
1 酶標(biāo)儀(檢測(cè)波長(zhǎng)450nm,參考波長(zhǎng)630nm)
2 微量移液器
3 前處理所需試劑及相關(guān)儀器
4 洗滌工作液:用去離子水將濃縮洗滌液按1:9體積進(jìn)行稀釋
例如:10ml洗滌工作液=1ml濃縮洗滌液+9ml去離子水
檢測(cè)程序:
在使用前,將所有試劑和樣品室溫。再次離心樣品解凍后測(cè)定前。據(jù)建議,所有樣品和標(biāo)準(zhǔn)來(lái)測(cè)定一式兩份。
1準(zhǔn)備好所有試劑,工作標(biāo)準(zhǔn)和樣品在前面的章節(jié)中。
2請(qǐng)確定井?dāng)?shù)的使用,并把任何剩余的井和入袋干燥劑,密封保鮮袋,將未使用的井在4°C的含量布局表。每孔加入100μl的標(biāo)準(zhǔn)和樣品。封面用膠粘帶提供。孵育2小時(shí),在37℃下一盤布局記錄標(biāo)準(zhǔn)和樣品檢測(cè)。
3每孔中取出的液體,不洗。
4向每孔中加入100μl*抗體(1倍)。蓋上一個(gè)新的膠粘帶。孵育1小時(shí),在37℃下(*抗體(1X)可能會(huì)出現(xiàn)混濁。預(yù)熱至室溫,輕輕混勻,直到出現(xiàn)均勻解決方案。)
5吸液的各孔和洗滌,共洗滌三次重復(fù)該過(guò)程兩次。洗凈,每孔填充洗滌緩沖液(200μL)使用噴瓶,多道移液器,歧管器,或autowasher,和,靜置2分鐘,*清除液體的每一步是*的良好的性能。zui后一次洗滌后,清除任何剩余洗滌緩沖液的吸ordecanting。倒置板和涂抹對(duì)干凈的紙巾。
6向每孔中加入100μl的HRP-抗*蛋白(1×)。量的微量滴定板,用一個(gè)新的粘接劑條。溫育1小時(shí),在37℃下。
7重復(fù)的愿望/洗滌過(guò)程中,在步驟6的5倍。
8將90μlTMB底物添加到每個(gè)孔中。孵育15-30分鐘,在37℃下避光。
9一站式解決方案,每孔加入底物,輕輕晃動(dòng)酶標(biāo)板,以確保充分混合
10在5分鐘內(nèi),設(shè)置至450nm,使用酶標(biāo)儀測(cè)定各孔的光密度。如果波長(zhǎng)校正,設(shè)置為540nm或570nm處。在540nm或570nm波長(zhǎng)在450nm處的讀數(shù)減去讀數(shù)。該減法校正板的光學(xué)缺陷。在450nm處未經(jīng)修正讀數(shù)直接,可能會(huì)比較高,不太準(zhǔn)確。
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