蔗糖系列_蔗糖磷酸合成酶SPS測試盒_微量法
測定方法:微量法
產(chǎn)品規(guī)格:100管/48樣
注 意 :正式測定管前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
蔗糖不僅是重要的光合產(chǎn)物,也是植物體內(nèi)運輸?shù)闹饕镔|(zhì),還是碳水化合物的貯存形式之一。SPS(EC 2.4.1.14)以果糖-6-磷酸為受體,形成的蔗糖磷酸在蔗糖磷酸酶的作用下形成蔗糖。一般把蔗糖磷酸酯合成酶-蔗糖磷酸酶系統(tǒng)看作是蔗糖合成的主要途徑。
蔗糖系列_蔗糖磷酸合成酶SPS測試盒_微量法
測定原理:
蔗糖磷酸合成酶催化果糖-6-磷酸形成蔗糖磷酸,蔗糖磷酸與CAS反應(yīng)可呈現(xiàn)顏色變化,在480nm下有特征吸收峰,酶活力大小與顏色的深淺成正比。
需自備的的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、水浴鍋、離心機、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰
試劑的組成和配制:
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:液體2.5mL×1瓶,-20℃保存;
試劑二:1000μg/mL蔗糖溶液10mL×1瓶,4℃保存;
試劑三:液體2mL×1瓶,4℃保存
試劑四:液體25mL×1瓶,4℃保存;
樣品測定的準(zhǔn)備:
按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。