(輔酶Ⅰ系列)乙醛脫氫酶(ALDH)測(cè)試盒
測(cè)定方法:微量法
產(chǎn)品規(guī)格:100管/96樣
注 意:正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義:
乙醛脫氫酶 (EC 1.2.1.10)是醛脫氫酶的一種,廣泛存在于各種動(dòng)物、植物和微生物體內(nèi)。主要作用是將乙醛氧化成乙酸,在酒精代謝中起主要作用。在人類和許多動(dòng)物體內(nèi),線粒體乙醛脫氫酶能把對(duì)生物體有害的醇類轉(zhuǎn)化,所以在細(xì)胞解毒研究中乙醛脫氫酶受到高度關(guān)注;同時(shí),乙醛脫氫酶在分子生物學(xué)以及相關(guān)疾病的檢測(cè)方面有較廣泛的研究應(yīng)用。
(輔酶Ⅰ系列)乙醛脫氫酶(ALDH)測(cè)試盒
測(cè)定原理:
在輔酶Ⅰ存在的條件下,乙醛脫氫酶催化乙醛和NAD+轉(zhuǎn)化為乙酸和NADH,在340nm處的吸光值會(huì)增加,測(cè)定340nm處的吸光值變化,可計(jì)算得到乙醛脫氫酶的活性。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:
天平、離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。
試劑組成和配制:
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體6mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體2mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑三:液體1mL×1支,4℃避光保存。
試劑四:液體1mL×1支,4℃保存。
試劑五:液體1mL×1支,4℃保存。
ALDH提?。?br/>
1.組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液)進(jìn)行冰浴勻漿,然后10000g,4℃,離心20min。
2.細(xì)胞:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);然后10000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測(cè)。
3.液體:直接檢測(cè)。