γ谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶γ-GT測試盒谷胱系列_分光法
測定方法：分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣
注 意：正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
測定意義：
γ-GT是γ-谷氨酰循環(huán)中的關(guān)鍵酶，催化GSH降解。γ-GT催化GSH或者其他γ-谷氨?；衔锷系摩?谷氨酰基轉(zhuǎn)移到受體。也可以催化GSH和其他γ-谷氨酰基化合物的水解，產(chǎn)生GLU鹽，在細(xì)胞外(GSH新陳代謝中起了重要的作用。
測定原理：
γ-GT催化谷氨酰對硝基苯胺中γ-谷氨酰基轉(zhuǎn)移給N-甘氨酰Gly，生成對硝基苯胺，在405nm有特征光吸收；通過測定405nm光吸收增加速率，來計算γ-GT酶活性。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)節(jié)移液器、1mL玻璃比色皿和蒸餾水
試劑組成和配制：
試劑一：液體50mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存。
試劑三：液體10mL×1瓶，4℃保存。
試劑四：液體37mL×1瓶，4℃保存。
工作液（在試劑二瓶中配制）：臨用前配制，把試劑三倒入試劑二瓶中，充分溶解（室溫過低時可以40℃水浴促進(jìn)溶解）；然后把試劑四倒入試劑二瓶中，混勻后室溫保存。
γ谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶γ-GT測試盒谷胱系列_分光法
粗酶液提?。?/p>
1.組織：按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進(jìn)行冰浴勻漿。8000g，4℃離心15min，取上清，置冰上待測。
2.細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（104個）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)胞加入1mL試劑一），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然后8000g，4℃，離心15min，取上清置于冰上待測。
3. 血清等液體：直接測定。
γ-GT測定操作
1. 分光光度計預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長到405 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二置于25℃（一般物種）或者37℃（哺乳動物）水浴中預(yù)熱30min（保證無沉淀）。
3. 測定管：取1mL玻璃比色皿，依次加入100μL上清液，900μL工作液，混勻后于405nm測定10 s和70 s時吸光度，記為A1和A2。
環(huán)保在線