花青素合成_ 類黃酮糖基轉(zhuǎn)移酶UFGT測試盒
測定方法:微量法
產(chǎn)品規(guī)格:100管/96樣
注 意:正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
花青素合成_ 類黃酮糖基轉(zhuǎn)移酶UFGT測試盒
測定意義:
花色苷是一類易溶于極性溶劑的天然色素,屬黃酮類化合物?;ㄉ諒V泛存在于植物的根、莖、葉、花和果實中,使其呈現(xiàn)由紅到紫等不同顏色,是植物主要的呈色物質(zhì)。類黃酮糖基轉(zhuǎn)移酶(UDP-glycose flavonoid glycosyltransferase, UFGT)是花色苷合成過程的后一個酶,可以把不穩(wěn)定的花色素催化成花色苷,在一定范圍內(nèi),UFGT活性與花色素苷的合成呈現(xiàn)正相關(guān)。
測定原理:
UFGT 催化 UDPG 與槲皮素生成 UDP;UDP 在丙酮酸激酶與乳酸脫氫酶作用下,氧化 NADH為NAD+,NAD+生成速度與 UDP 含量成正比,通過 340nm 吸光度下降速度反映 UFGT 活性。
需自備的儀器和用品:
酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、96 孔板、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:粉劑×1 瓶,-20℃避光保存;臨用前加入 20mL 試劑四溶解。
試劑二:粉劑×1 瓶,-20℃保存;
試劑三:液體 100μL×1 管,4℃避光保存;
試劑四:液體 50mL×1 瓶,4℃保存;
樣品測定的準(zhǔn)備:
按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液),冰浴中勻漿。10000g ,4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。