花青素合成系列_ 查爾酮異構(gòu)酶(CHI)測(cè)試盒
測(cè)定方法：微量法
產(chǎn)品規(guī)格：100管/96樣
注 意：正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
花青素合成系列_ 查爾酮異構(gòu)酶(CHI)測(cè)試盒
測(cè)定意義：
查爾酮異構(gòu)酶(Chalcone isomerase, CHI)是個(gè)被認(rèn)識(shí)的黃酮類化合物合成相關(guān)酶，也是黃酮代謝途徑中的關(guān)鍵酶之一。查爾酮異構(gòu)酶和查爾酮合酶一起構(gòu)成了黃酮類化合物生物合成的限速酶。
測(cè)定原理：
查爾酮異構(gòu)酶（CHI）催化查爾酮環(huán)化形成 4,5,7-三羥基黃烷酮，通過測(cè)定 381nm 下的吸光度變化表示 CHI 的活性。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研缽、冰和蒸餾水
試劑的組成：
提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；
試劑一：液體 25mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：粉劑×1 瓶，4℃保存；用時(shí)加入 20mL 試劑一充分溶解待用；用不完的試劑 4℃保存。
粗酶液提?。?br/>
按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。
測(cè)定步驟：
1、 分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 381nm，蒸餾水調(diào)零。
2、 樣本測(cè)定表
在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 10µL 上清液和 190µL 試劑二，立即混勻并記錄 381nm 下初始吸光值 A1 和 37℃保溫 30min 后的吸光值 A2。計(jì)算 ΔA＝A2-A1。
環(huán)保在線