半胱-氨酰亞砜裂解酶CSL測試盒_氨基酸代謝
測定方法:分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣
注 意:正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
測定意義
半胱氨酰亞砜裂解酶(CSL)廣泛存在于百合科蔥屬(如大蒜和洋蔥),十字花科蕓薹屬
(如卷心菜,菜花,西蘭花),以及豆科中的合金歡屬中,并通常被稱為蒜氨酸酶(Alliinase)。香菇酸在γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶和半胱-氨酸亞砜裂解酶的作用下轉(zhuǎn)化成香菇精,以及產(chǎn)生丙酮酸、乙醛、甲醛和NH3。CSL是內(nèi)源性甲醛生成的關(guān)鍵酶之一,測定CSL活性對于研究食品安全具有重要意義。
半胱-氨酰亞砜裂解酶CSL測試盒_氨基酸代謝
測定原理
CSL催化S-甲基-L-半胱-氨酸亞砜反應(yīng)產(chǎn)生丙酮酸,與2,4-二硝-基苯肼反應(yīng),在堿性條件下顯棕紅色,在510nm下有特征吸收峰。
自備實驗用品及儀器
天平、研缽、離心機、分光光度計、1mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋、蒸餾水。
試劑組成和配制
提取液:液體60mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1瓶,4℃避光保存,臨用前加入2mL水溶解,用不完的試劑分裝后-20℃保存;
試劑二:粉劑×1瓶,-20℃避光保存,臨用前加入10mL水溶解,用不完的試劑分裝后-20℃保存;
試劑三:液體15mL×1瓶,4℃保存。
試劑四:液體6mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑五:液體30mL×1瓶,4℃保存。
樣本處理
按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿,4℃浸提40min。12000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。