鳥-氨酸轉氨酶(OAT)測試盒_氨基酸代謝系列
測定方法:分光光度法
產品規(guī)格:50管/48樣
注 意: 正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義
脯-氨酸是植物體內適應逆境脅迫的一種重要的滲透調節(jié)物質。高等植物中脯-氨酸代謝因其初始底物不同,分為谷-氨酸( Glu) 和鳥-氨酸( Orn) 兩條合成途徑。鳥-氨酸轉氨酶( δ-OAT) 是 是以鳥-氨酸為前體合成脯-氨酸途徑的關鍵酶,對植物適應逆境脅迫起關鍵作用。
鳥-氨酸轉氨酶(OAT)測試盒_氨基酸代謝系列
測定原理
鳥-氨酸和α-酮戊二酸在鳥-氨酸轉氨酶和NADH作用下發(fā)生氨基轉移反應生成吡咯啉-5-羧酸(P5C),同時產生NAD,通過檢測340nm處的吸光度的變化可反映出鳥-氨酸轉氨酶活性的高低。
自備實驗用品及儀器
天平、低溫離心機、研缽、紫外可見分光光度計、1mL石英比色皿。
試劑組成和配制
提取液:液體55mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體70 mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存;臨用前加20mL試劑一充分溶解;用不完的試劑4℃保存。
試劑三:粉劑×1瓶,4℃保存;臨用前加20mL試劑一充分溶解;用不完的試劑4℃保存。
試劑四:粉劑×2瓶,-20℃保存;臨用前每瓶加10mL試劑一充分溶解;現(xiàn)配現(xiàn)用。
酶液提取
1.組織:按照質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g,加入1mL提取液)加入提取液,冰浴勻漿后于4℃,10000g離心10min,取上清置冰上待測。
2.細胞:按照細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后4℃,10000g離心10min,取上清置冰上待測。
液體:直接檢測。