谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT/AST)測試盒_氨基酸代謝系列
測定方法:分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣
正式測定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義
GOT( 2.6.1.1)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,催化可逆轉(zhuǎn)氨基反應(yīng),是氨基酸代謝的重要酶。此外,GOT在心肌細(xì)胞中含量,臨床上一般常作為心肌梗塞和心肌炎的輔助檢查。肝臟損害時(shí)其血清濃度也可升高。
谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT/AST)測試盒_氨基酸代謝系列
測定原理
GOT催化 α-同戊二酸和天門冬-氨酸發(fā)生轉(zhuǎn)氨基反應(yīng),生成谷-氨酸和草酰乙酸,草酰乙酸進(jìn)一步自行脫羧生成丙酮酸;丙酮酸可與2,4-二硝-基苯肼反應(yīng)生成2,4-二硝-基苯腙,在堿性條件下顯棕紅色;測定505nm吸光度的變化,即可計(jì)算GOT酶活力。
需自備的儀器和用品
可見分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制
提取液:液體30mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體5mL×1瓶, 4℃保存;
試劑二:液體5mL×1瓶, 4℃保存;
試劑三:液體50 mL×1瓶,4℃保存;
樣品測定的準(zhǔn)備
1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備:
細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
2、血清(漿)樣品:直接檢測。