亮-氨酸氨基肽酶LAP測(cè)試盒_氨基酸代謝系列
測(cè)定方法:分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣
注 意 : 正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義:
LAP是一類能水解肽鏈N-末端為亮-氨酸的酶,廣泛存在于肝、腎、胰等組織中,尤其以肝臟中含量為豐富。各類肝病患者因肝細(xì)胞損傷,血清LAP的活性均有不同程度的升高,因此,血清LAP活性的檢測(cè)能從不同側(cè)面反映各種肝病的發(fā)生和發(fā)展。
亮-氨酸氨基肽酶LAP測(cè)試盒_氨基酸代謝系列
測(cè)定原理:
LAP分解L-亮氨酰對(duì)硝基苯胺生成對(duì)硝基苯胺,后者在405nm有大吸收峰,通過(guò)測(cè)定吸光值升高速率來(lái)計(jì)算LAP活性。
自備用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:液體40mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1瓶,-20℃保存;
樣本的前處理:
1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備:
細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為1000~5000:1的比例(建議2000萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
2、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。