氨基酸代謝系列_谷-氨酸(Glu)含量測試盒
測定方法:微量法
產(chǎn)品規(guī)格:100管/96樣
注 意:正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
Glu 廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,不僅是組成蛋白質(zhì)的 20 種氨基酸之一,而且通過轉(zhuǎn)氨基作用參與多種氨基酸合成,是生物體內(nèi)主要氨基來源之一。此外,Glu 還是味精的主要有效成分,常用做食品添加劑以及香料生產(chǎn)。
氨基酸代謝系列_谷-氨酸(Glu)含量測試盒
測定原理:
利用專用提取液提取,然后用顯色劑進(jìn)行顯色,顯色后在 570nm 下進(jìn)行測定。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研缽、冰、蒸餾水。
試劑的組成和配制:
試劑一:液體 120mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1 瓶, 4℃保存;臨用前加入 5mL 蒸餾水充分溶解混勻,用不完的試劑仍 4℃ 保存。
谷-氨酸提取:
1、細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞樣品:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104 個):試劑一體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 試劑一),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);8000g 常溫離心 10min,取上清,置冰上待測。
2、組織樣品:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 試劑一),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 常溫離心 10min,取上清,置冰上待測。
3、血清(漿)或細(xì)胞培養(yǎng)液樣品:按照血清(漿)或細(xì)胞培養(yǎng)液體積(mL):試劑一體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議取 0.1mL 血清(漿)或者細(xì)胞培養(yǎng)液加入 1mL 試劑一),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 常溫離心 10min,取上清,置冰上待測。