土壤系列_土壤谷-氨酰胺酶(S-GLS)測試盒
測定方法:微量法
產(chǎn)品規(guī)格:100管/96樣
注 意:正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
GLS(EC 3.5.1.2)存在于高等動物和某些細(xì)菌以及植物根中,催化谷氨-酰胺水解成谷-氨酸和氨,在氮素代謝中具有重要調(diào)控作用,尤其是調(diào)節(jié)游離氨含量和尿素代謝。
土壤系列_土壤谷-氨酰胺酶(S-GLS)測試盒
測定原理:
S-GLS催化谷氨-酰胺水解成L-谷-氨酸和氨,利用奈氏試劑檢測氨增加的速率,即可計算其酶活性。
需自備儀器和用品:
臺式離心機(jī)、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍、研缽、甲苯、冰和雙蒸水。
試劑組成和配制:
試劑一×1瓶,15 mL,4 ℃保存;
試劑二×1瓶,40 mL,4 ℃保存;
試劑三×1瓶,60 mL,常溫保存;
試劑四×1瓶,5 mL,常溫保存;
試劑五×1瓶,3 mL,常溫保存;
試劑六×1瓶,3 mL,常溫避光保存。
測定步驟:
1、分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至420nm,蒸餾水調(diào)零。
2、樣品測定(在EP管中加入下列試劑):
試劑名稱(uL)測定管對照管
樣本0.1
甲苯2525
振蕩混勻,室溫放置15min
試劑一100100
試劑二400400
混勻,37℃水浴2 小時
試劑三525525
混勻,8000 g,25℃離心10 min;取上清液,依次加入下列試劑
上清液130130
試劑四3030
試劑五2020
試劑六2020
混勻,室溫靜置15min,420nm處讀取測定管和對照管吸光值,
計算ΔA=A測定管-A對照管。對照管只要做一管。