土壤系列_土壤纖維素酶(S-CL)測(cè)試盒
測(cè)定方法:微量法
產(chǎn)品規(guī)格:100管/48樣
注 意 :正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義:
S-CL主要來(lái)源于土壤微生物,S-CL催化農(nóng)作物秸稈產(chǎn)生的葡萄糖是主要的碳源營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。
土壤系列_土壤纖維素酶(S-CL)測(cè)試盒
測(cè)定原理:
采用蒽酮比色法測(cè)定S-CL催化纖維素降解產(chǎn)生的還原糖的含量。
需自備的儀器和用品:
酶標(biāo)儀/可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、96孔板/微量石英比色皿、甲苯、硫酸(不允許快遞)和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
試劑一:甲苯10mL×1瓶,4℃保存;(自備)
試劑二:液體6mL×1瓶,4℃保存;
試劑三:液體40mL×1瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×1瓶,4℃保存; 臨用前加入5mL蒸餾水和45mL濃硫酸充分溶解待用。
樣品處理:
新鮮土樣自然風(fēng)干或37度烘箱風(fēng)干,過(guò)30~50目篩。
加樣表和測(cè)定步驟:
對(duì)照管測(cè)定管
風(fēng)干土樣(g)0.050.05
試劑一 (μL)5050
振蕩混勻15min
試劑二(μL )90
試劑三(μL )370370
蒸餾水(μL )18090
37℃振蕩反應(yīng)3h后,90℃水浴15min(蓋緊,防止水分散失),冷卻后
8000g 25℃離心10min,取上清,得糖化液
糖化液 (μL)140140
試劑四 (μL)260260
混勻, 90℃水浴10min(蓋緊,防止水分散失),冷卻,取200μL至微量石英比色皿或96孔板中,測(cè)620nm下吸光值A(chǔ),計(jì)算ΔA=A測(cè)定管-A對(duì)照管。每個(gè)測(cè)定管設(shè)一個(gè)對(duì)照管。