果膠酶測(cè)試盒_果膠系列
測(cè)定方法:分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣
注 意 :正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義:
果膠酶(pectinase)是一類分解果膠質(zhì)酶類的總稱,包括原果膠酶,果膠酯酶,多聚半乳糖醛酸酶和果膠裂解酶四大類,廣泛存在于植物果實(shí)和微生物中,主要用于食品、釀酒、環(huán)保、醫(yī)藥、紡織及日化用品行業(yè)。
果膠酶測(cè)試盒_果膠系列
測(cè)定原理:
果膠酶水解果膠生成半乳糖醛酸,具有還原性醛基,與DNS試劑反應(yīng)生成紅棕色物質(zhì),在540nm有特征吸收峰,測(cè)定540nm處吸光值變化可計(jì)算得果膠酶活性。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:
天平、低溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。
試劑組成和配制:
提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體30mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑×2瓶,4℃保存;臨用前加入12.5mL試劑一,50℃加熱溶解,用不完的試劑4℃保存一周。
試劑三:液體30mL×1瓶,4℃避光保存。
酶液提取:
1.組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。10000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
2.細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);然后10000g,4℃離心10min,取上清置于冰上待測(cè)。
3. 細(xì)胞培養(yǎng)液等:直接檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
1.試劑二若有沉淀析出,請(qǐng)置于50℃加熱溶解。
2.測(cè)定之前請(qǐng)先做預(yù)實(shí)驗(yàn),如果吸光值較高或較低,請(qǐng)用提取液做適當(dāng)?shù)南♂尰蛘呒哟髽颖玖?,并在?jì)算公式中乘以稀釋倍數(shù)或者以實(shí)際加入的樣本體積參與計(jì)算。
3.煮沸樣本建議在沸水中煮沸10分鐘,以將酶*滅活。