半乳糖醛酸含量測(cè)試盒_果膠系列
測(cè)定方法:分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣
注 意:正式測(cè)定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義:
果膠是一類廣泛存在于植物細(xì)胞壁的初生壁和細(xì)胞中間片層的雜多糖。半乳糖醛酸是果膠酸的組成單位,也是果膠的主要成分,存在于植物的粘液、樹膠和細(xì)菌多糖中。
半乳糖醛酸含量測(cè)試盒_果膠系列
測(cè)定原理:
半乳糖醛酸在 70℃下與濃硫酸反應(yīng)生成 5-甲?;?2-呋喃甲酸,5-甲?;?2-呋喃甲酸與 3,5-二甲-基苯-酚反應(yīng)產(chǎn)生有色物質(zhì),在 450nm 下有大吸光值。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:
天平、低溫離心機(jī)、分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿、恒溫水浴鍋、硫酸、蒸餾水。
試劑組成和配制:
提取液:液體 60mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 4mL×1 瓶,4℃保存。
試劑二:液體 3mL×1 瓶,4℃避光保存。
酶液提取:
稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 蒸餾水,進(jìn)行冰浴勻漿。10000g 4℃離心 10min,棄上清,留沉淀。沉淀中加入 1mL 提取液,混勻后 90℃水浴 2h,冷卻至室溫,10000g4℃離心 10min,取上清待測(cè)。
計(jì)算公式:
標(biāo)準(zhǔn)曲線為 y = 4.5028x - 0.3763,R2 = 0.9969;x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度,mg/mL;y 為吸光值△A。半乳糖醛酸(μmol/g 鮮重)=( A+0.3763) ÷ 4.5028÷W×V 樣總÷194×1000
=1.14×(A+0.3763)÷W
V樣總:加入提取液體積,1mL;W,樣本質(zhì)量,g;194,半乳糖醛酸分子量。