水溶性果膠(WSP)含量測(cè)試盒_果膠系列
測(cè)定方法:分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣
注 意 :正式測(cè)定前取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義:
果膠是構(gòu)成細(xì)胞初生壁和中膠層的主要成分,主要由原果膠、果膠酸甲酯和果膠酸組成。果膠中含有半乳糖醛酸、乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸等,是許多高等植物細(xì)胞壁中含量-豐富的多糖成分,其獨(dú)-特的物理、化學(xué)性質(zhì)影響著植物源食品的口感和品質(zhì)。果膠間以Ca2+橋及其他離子鍵、氫鍵、糖苷鍵、酯鍵和苯環(huán)偶聯(lián)的方式交聯(lián),通過(guò)不同的抽提方法可以提取各種形式的果膠,如水溶性果膠(WSP)、離子結(jié)合型果膠(ISP)和共價(jià)結(jié)合果膠(CSP)。
測(cè)定原理:
利用酸溶液提取得到(WSP)可溶性果膠,采用咔唑比色法測(cè)定果膠含量。果膠水解成半乳糖醛酸,在硫酸溶液中與咔唑試劑進(jìn)行縮合反應(yīng),生成物質(zhì)在530 nm處有大吸收峰。
水溶性果膠(WSP)含量測(cè)試盒_果膠系列
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、80%乙醇、丙酮、濃硫酸(不允許快遞)、研缽和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
試劑一:液體50mL× 1瓶,4℃保存。
試劑二:液體50mL× 1瓶,4℃保存。
試劑三:標(biāo)準(zhǔn)液1mL× 1支,4℃保存。
試劑四:液體5 mL× 1瓶,4℃保存;
樣品的前處理:
1、細(xì)胞壁的提取:取約0.3g樣本,加入1mL 80%乙醇,室溫快速勻漿,95℃水浴20min,冷卻至室溫,4000g 25℃離心10min,棄上清。沉淀加入1.5mL80%乙醇和丙酮各洗一遍(渦旋振蕩2min左右,4000g 25℃離心10min,棄上清即可),沉淀即為粗細(xì)胞壁,加入1mL試劑一(去除淀粉)浸泡15小時(shí),4000g 25℃離心10min,棄上清,將沉淀干燥,稱重得細(xì)胞壁物質(zhì)(CWM)。
2、WSP的提?。悍Q取烘干的CWM 3mg,加入1mL試劑二,充分勻漿(若烘干物質(zhì)質(zhì)地堅(jiān)硬,可先研碎后再加入1mL試劑二勻漿,或者用勻漿器勻漿)。8000g 4℃離心10min,取上清液待測(cè)。