果膠系列_果膠甲酯化程度測(cè)試盒
測(cè)定方法：微量法
產(chǎn)品規(guī)格：100管/96樣
注 意：正式測(cè)定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義：
植物細(xì)胞壁中的果膠是植物初生細(xì)胞壁的主要成分，除了起結(jié)構(gòu)支撐、物質(zhì)運(yùn)輸?shù)茸饔猛?，還具有抵抗逆境的作用。果膠甲酯化程度影響了細(xì)胞壁的堅(jiān)韌程度及其抗性。
果膠系列_果膠甲酯化程度測(cè)試盒
測(cè)定原理：
果膠甲酯鍵經(jīng)皂化處理后釋放出甲醇，甲醇與 2,4-戊二酮反應(yīng)顯色，在 412nm 下測(cè)定吸光值；同時(shí)半乳糖醛酸在 70℃下與濃硫酸反應(yīng)生成 5-甲?；?2-呋喃甲酸，5-甲?；?2-呋喃甲酸與 3,5-二甲基-苯-酚反應(yīng)產(chǎn)生有色物質(zhì)，在 450nm 下有大吸光值。以甲醇生成量與半乳糖醛酸含量的比值代表果膠甲酯化程度。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器：
天平、低溫離心機(jī)、酶標(biāo)儀、96 孔板、恒溫水浴鍋、蒸餾水、硫酸。
試劑組成和配制：
提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體 3mL×1 瓶，4℃保存。
試劑二：液體 3mL×1 瓶，4℃保存。
試劑三：液體 3mL×1 瓶，4℃避光保存。
試劑四：液體 2.5mL×1 瓶，4℃避光保存。
試劑五：粉劑×1 瓶，4℃避光保存；臨用前加入 22mL 試劑六充分溶解待用，用不完的試劑 4℃避光保存。
試劑六：液體 25mL×1 瓶，4℃保存。
試劑七：液體 3mL×1 瓶，4℃保存。
試劑八：液體 2.5mL×1 瓶，4℃避光保存。
酶液提取：
稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 蒸餾水，進(jìn)行冰浴勻漿。10000g 4℃離心 10min，棄上清，留沉淀。沉淀中加入 1mL 提取液，混勻后 90℃水浴 2h，冷卻至室溫，10000g4℃離心 10min，取上清待測(cè)。
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