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所 在 地上海市
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更新時間:2015-07-30 09:07:09瀏覽次數(shù):296次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線數(shù)據(jù),真實報告。豬圓環(huán)病毒Ⅱ型抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)全國各地區(qū)一律優(yōu)惠,購買前我司提供電子版說明書,符合實驗要求再購買,ELISA試劑盒我公司為客戶提供售前、售中、售后一條龍服務(wù),敬請放心購買。
豬圓環(huán)病毒Ⅱ型抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)使用說明書
【產(chǎn)品名稱】
通用名:豬圓環(huán)病毒Ⅱ型抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
英文名:Test Kit for Antibodies to Porcine Circovirus 2 (ELISA)
【包裝規(guī)格】 96T×1/盒、96T×2/盒
【預(yù)期用途】 豬圓環(huán)病毒病是由豬圓環(huán)病毒Ⅱ型(Porcine Circovirus 2,PCV2)引起的豬的一種多系統(tǒng)功能障礙性疾病,其臨床表現(xiàn)多種多樣,主要為斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合癥、豬皮炎與腎病綜合征、母豬繁殖障礙等。
本試劑用于檢測豬血清中豬圓環(huán)病毒Ⅱ型抗體,可用于豬圓環(huán)病毒Ⅱ型疫苗免疫效果評價。
【原 理】
本試劑盒系由預(yù)包被豬圓環(huán)病毒Ⅱ型重組cap蛋白的酶標板、酶標記物及其他配套試劑組成,應(yīng)用酶聯(lián)免疫法(ELISA)原理檢測豬血清、血漿樣本中豬圓環(huán)病毒Ⅱ型抗體。實驗時在酶標板中加入對照血清和待檢樣本,經(jīng)溫育后若樣品中含有豬圓環(huán)病毒Ⅱ型抗體,則將與酶標板上抗原結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的其他成分后;再加入酶標記物,與酶標板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合;再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標記物,在孔中加TMB底物液,與酶反應(yīng)形成藍色產(chǎn)物,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān);加入終止液終止反應(yīng)后,產(chǎn)物變?yōu)辄S色;用酶標儀在450nm波長測定各反應(yīng)孔中的吸光值,即可知樣品是否含有豬圓環(huán)病毒Ⅱ型抗體。
【試劑盒組成】
序號 名稱 規(guī)格(96T×1) 規(guī)格(96T×2)
1. 酶標板 96T×1 96T×2
2. 酶標記物 (紅蓋) 11ml×1 11ml×2
3. 樣品稀釋液 (黃蓋) 50ml×1 50ml×1
4. 20X濃縮洗滌液 40ml×1 40ml×1
5. 底物液A (白蓋) 6ml×1 11ml×1
6. 底物液B (黑蓋) 6ml×1 11ml×1
7. 終止液 (黃蓋) 6ml×1 11ml×1
8. 陽性對照 (紅蓋) 1.0 ml×1 1.5 ml×1
9. 陰性對照 (綠蓋) 1.0 ml×1 1.5 ml×1
10. 蓋板膜 1張 2張
11. 自封袋 1個 1個
12. 說明書 1份 1份
【儲存及有效期】 于2~8℃避光保存,有效期為12個月。
包被板開封后請于2~8℃避光保存,避免受潮。使用期限為2個月。
【適用儀器】 含450nm、630nm波長的酶標儀,37℃恒溫設(shè)備,可調(diào)微量移液器。
【樣品準備】
1.取動物全血按常規(guī)方法制備血清,要求血清清亮,無溶血、無污染。樣品1周內(nèi)可于2~8℃保存,*需置-20℃保存。
2.用樣品稀釋液將待檢血清按40倍稀釋(如5μl血清加入195μl樣品稀釋液中,混勻)。陰、陽性對照不用稀釋。
3.濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫使沉淀溶解,然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。
【檢驗方法】
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復(fù)至室溫。
2.取所需用量酶標板條,設(shè)空白對照1孔、陰性/陽性對照各2孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。
3.空白對照孔加樣品稀釋液100μl;陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100μl;樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。
4.混勻,置37℃反應(yīng)30分鐘。
5.扣去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,重復(fù)洗滌5次,拍干。
6.每孔加酶標記物100μl(空白孔除外)。置37℃反應(yīng)30分鐘。
7.洗滌,同步驟5。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混勻,37℃避光反應(yīng)10分鐘。
9.每孔加終止液50μl,混勻,用空白孔調(diào)零,于450nm(可用630nm作參比波長)測定各孔吸光值(A值)。
【參考值】 實驗正常的情況下,陰性對照≤0.10,陽性對照≥0.6。
【檢驗結(jié)果的解釋】
1.樣品A值≥0.38為陽性;樣品A值在0.2到0.38之間為可疑;樣品A值<0.2為陰性。
2.本實驗結(jié)果為陰性或可疑時表明豬只抗體水平不足,建議補打相應(yīng)疫苗。
【試驗方法的局限性】
該試驗僅作為定性檢測豬血清、血漿中豬圓環(huán)病毒Ⅱ型抗體,根據(jù)A值高低可作抗體水平強、中、弱的粗略評估。
【注意事項】
1.實驗操作時需戴手套、穿工作衣,嚴格健全和執(zhí)行消毒隔離制度,各種實驗廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
2.終止液具有腐蝕性,應(yīng)避免接觸皮膚和衣物,如不慎接觸請立即用大量自來水沖洗。
3.酶標板從冷藏環(huán)境中取出時應(yīng)恢復(fù)至室溫方可開袋,未用完的酶標板需放入有干燥劑的密封袋中保存。
4.濃縮洗滌液在低溫時容易結(jié)晶,使用時需恢復(fù)至室溫以*溶解。
5.洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。
6.用于檢測的樣品應(yīng)保持新鮮。
7.試驗結(jié)果的判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。
8.不同批號試劑組分不得混用。
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