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江蘇寶萊生物科技有限公司
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更新時間：2015-04-14 09:19:54瀏覽次數(shù)：84次
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人Jo1抗體/抗組氨酰tRNA合成酶抗體（Jo1/HRS）elisa試劑盒實驗原理： 用純化的MT抗體包被微孔板，制成固相載體，往微孔中依次加入標本或標準品、*化的MT抗體HRP標記的親和素，經(jīng)過*洗滌后用底物（TMB）顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的MT呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。
人Jo1抗體/抗組氨酰tRNA合成酶抗體(Jo1/HRS)elisa試劑盒實驗原理：
用純化的MT抗體包被微孔板，制成固相載體，往微孔中依次加入標本或標準品、*化的MT抗體、HRP標記的親和素，經(jīng)過*洗滌后用底物（TMB）顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的MT呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。
產(chǎn)品規(guī)格：48T
產(chǎn)品英文：Human Jo-1 Antibody,Jo1/HRS elisa Kit
產(chǎn)品用途：僅供科研使用
檢測范圍：15.6 pg/ml - 1,000 pg/ml
特 異 性：本試劑盒可同時檢測重組或天然的，且與其它相關蛋白無交叉反應
在人Jo1抗體/抗組氨酰tRNA合成酶抗體(Jo1/HRS)elisa試劑盒中，進行各項實驗條件的選擇是很重要的，其中包括：
(1)固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進行反應，觀察其顯色反應是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2)包被抗體(或抗原)的選擇：將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后，在其它試驗條件相同時，觀察陽性標本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg/ml。
(3)酶標記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法"(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應，而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用，應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后，應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是雙氧水在臨用前加入。
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