【產(chǎn)品名稱】：豬Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)elisa試劑盒
【英文名稱】：PoFAine N-terminal procollagen Ⅲ propeptide,PⅢNP elisa Kit
【檢測種屬】：大鼠等動植物。
【產(chǎn)品用途】：被測樣品定性或定量分析
【產(chǎn)品規(guī)格】：48T
【檢測方法】：酶免法/酶聯(lián)免疫法(ELISA)
【保存條件】：2-8℃
【供 貨 期】：1-3天(現(xiàn)貨供應(yīng))
【產(chǎn)品性狀】：液體盒裝
【服務(wù)優(yōu)勢】：全程提供ELISA實驗技術(shù)指導(dǎo)和ELISA試劑盒免費代測
【樣本儲存】：收集標(biāo)本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測的標(biāo)本，儲存在4℃?zhèn)溆茫缬刑厥庠蛐枰芷谑占瘶?biāo)本，將標(biāo)本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復(fù)凍融。標(biāo)本2-8℃可保存48小時，-20℃可保存1個月。-70℃可保存6個月。部分激素類標(biāo)本需添加*。
豬Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)elisa試劑盒標(biāo)本收集:
1.血清：全血標(biāo)本請于室溫放置2小時或4℃**后于1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，收集血液的試管應(yīng)為一次性的無熱原，無內(nèi)毒素試管。
2.血漿：抗凝劑*使用EDTA，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測。避免使用溶血，高血脂標(biāo)本。
3. 其它生物標(biāo)本：1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測
4. 標(biāo)本應(yīng)清澈透明，懸浮物應(yīng)離心去除。
5.標(biāo)本收集后若不及時檢測，請按一次使用量分裝，凍存于-20℃/-80℃電冰箱內(nèi)，避免反復(fù)凍融，1-6月內(nèi)檢測,4℃保存的應(yīng)在1周內(nèi)進(jìn)行檢測。
6. 如果您的樣本中檢測物濃度高于標(biāo)準(zhǔn)品zui高值，請根據(jù)實際情況，做適當(dāng)倍數(shù)稀釋(建議先做預(yù)實驗，以確定稀釋倍數(shù))。
溫育是ELISA測定中影響測定成敗zui為關(guān)鍵的一個因素。ELISA作為一種固相免疫測定，抗原抗體的結(jié)合反應(yīng)在固相上進(jìn)行，要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原*結(jié)合，必須在一定的溫度條件下反應(yīng)一定的時間。溫育所需時間與溫度成反比，即溫度越高，則所需時間相對較短。zui為常用的溫育溫度有37℃和室溫，其次是43℃和2～8℃。
溫育這一步是臨床ELISA測定中zui容易出現(xiàn)問題的步驟。通常目前國內(nèi)ELISA商品試劑盒的反應(yīng)溫育時間為37℃ 30分鐘～1小時，elisa試劑盒則通常為37℃ 1～2小時才能有較*的結(jié)合，低于1小時，可能會影響測定下限。因此，關(guān)于溫育，在實際測定操作中一定要注意以下幾點：
(1)要保證在設(shè)定的溫度下有足夠的反應(yīng)時間。一般來說，加完樣本和/或反應(yīng)試劑后，將微孔板從室溫拿至水浴箱或溫箱中時，孔內(nèi)溫度從室溫升至37℃，需要一定的時間，尤其是在室溫比較低以及非水浴的狀態(tài)下，這段升溫時間可能還比較長，而在臨床實驗室中，很少有人注意這個問題，通常是將微孔板一放入溫箱即開始計時，這樣就很容易造成實際測定中溫育時間不夠，弱陽性樣本測不出來的問題。曾有一地處南方的血站同行提出了一個問題，就是在每一年的冬季總有那么一個多月的時間，在做HBsAg測定的室內(nèi)質(zhì)控中，測定由衛(wèi)生部臨床檢驗中心供應(yīng)的1 ng/ml弱陽性樣本時，總是測不出來，不知原因為何？這可能就與南方冬天室內(nèi)溫度較低有關(guān)，此時微孔板轉(zhuǎn)入溫箱后37℃溫育時間不夠，以致弱陽性樣本測定為陰性。因此，為保證37℃下足夠的溫育時間，臨床實驗室可自行確定本實驗室不同季節(jié)(不同室溫下)微孔板從室溫拿至溫箱后需要多長時間孔內(nèi)溫度才能達(dá)到37℃，從而適當(dāng)延長板條在溫箱中的放置時間。具體的做法是，用一小溫度計放置板孔反應(yīng)溶液中測量觀察即可。
(2)溫育溫度的選擇。在豬Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)elisa試劑盒等elisa試劑盒的說明書中，指出溫育溫度可有兩種，例如，一種是37℃下1小時，另一種則為43℃下45分鐘。從免疫測定的抗原抗體反應(yīng)的本質(zhì)來看，在較低的溫度下反應(yīng)較長的時間zui為*。如2～8℃下反應(yīng)24小時。較高的反應(yīng)溫度，由于分子運動的加憐惜，反應(yīng)時間縮短，這一點對分子含量較多的強陽性樣本的測定沒有問題，但對分子含量少的弱陽性樣本則有漏檢的可能。因此，我們建議在臨床ELISA測定中盡量使用較低溫育溫度較長反應(yīng)時間的條件。
