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更新時間:2018-06-05 09:16:07瀏覽次數(shù):179次
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人干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)elisa試劑盒由于底物顯色劑對光及其敏感,因此要避光保存。要注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán),其有類似過氧化物的活性,因此,在以HRP為標(biāo)記酶的ELISA測定中,如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過程中吸附于固相,從而與后面加入的HRP底物反應(yīng)顯色
人干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)elisa試劑盒實驗原理:
用純化的MT抗體包被微孔板,制成固相載體,往微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、*化的MT抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物(TMB)顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的MT呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
產(chǎn)品規(guī)格:48T
產(chǎn)品英文:Human interferon-inducible protein 10,IP-10 elisa Kit
產(chǎn)品用途:僅供科研使用
檢測范圍:15.6 pg/ml - 1,000 pg/ml
特 異 性:本試劑盒可同時檢測重組或天然的,且與其它相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)
人干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)elisa試劑盒實驗注意事項
1.血清標(biāo)本如是以無菌操作分離,則可以在2~8℃下保存一周,如為有菌操作,則建議冰凍保存。樣本的長時間保存,應(yīng)在-70℃以下。
2.在使用微量加樣器時,吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使吸取標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3.吸取液體時速度不易太快,以免產(chǎn)生氣泡,吸取的量不夠準(zhǔn)確。
4.樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細(xì)菌污染,一則細(xì)菌的生長,其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用;二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶,如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應(yīng)酶作標(biāo)記的測定方法產(chǎn)生非特異性干擾。1.5 吸取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差。
5.液體全部加入酶標(biāo)孔后,將酶標(biāo)板放在桌子上平行輕輕搖晃30s,使液體充分混合均勻,也使其得到充分的反應(yīng)。
6.孵育時要使蓋板膜封好酶標(biāo)板,防止水分蒸發(fā),以防曲線不成線性。
7.實驗前30min將試劑盒中的所有試劑從冰箱取出,使試劑盒中的所有試劑與提取好的樣品溶液的溫度相同,酶標(biāo)板只要取出所需量。
8.由于底物顯色劑對光及其敏感,因此要避光保存。
要注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán),其有類似過氧化物的活性,因此,在以HRP為標(biāo)記酶的ELISA測定中,如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過程中吸附于固相,從而與后面加入的HRP底物反應(yīng)顯色
9.手工洗板時每次加入洗滌液后。應(yīng)靜置15~30s,不要將一個酶標(biāo)孑L中的洗滌液濺入另一酶標(biāo)孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標(biāo)板放在毛巾或吸水紙上拍干。
10.檢測吸光度前應(yīng)將酶標(biāo)儀打開,將其預(yù)熱30min以上。
11.底物為TMB,避免與皮膚相接觸。終止液為2tool的濃**具有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸皮膚。
12.孵育的時間應(yīng)該嚴(yán)格按照試劑盒說明書上的時間為準(zhǔn)。
13.要盡量做雙孔實驗,這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,又能反映出試劑盒的精密度。
14.冰凍保存的血清標(biāo)本須注意避免因停電等造成的反復(fù)凍融。標(biāo)本的反復(fù)凍融所產(chǎn)生的機(jī)械剪切力將對標(biāo)本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用,從而引起假陰性結(jié)果。此外,凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)注意,不要進(jìn)行劇烈振蕩,反復(fù)顛倒混勻即可。
15.對樣本的結(jié)果有疑問時需要使用其他檢測方法進(jìn)行驗證。
16.沒有去離子水或雙蒸水時,可以使用娃哈哈純凈水配制溶液,切勿使用自來水。
17.標(biāo)本在保存中如出現(xiàn)細(xì)菌污染所致的混濁或絮狀物時,應(yīng)離心沉淀后取上清檢測。
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