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反相高效液相色譜法測(cè)定兔血清中5-氟*的濃度

閱讀:471發(fā)布時(shí)間:2020-5-26

  5-氟*在1957年合成,為嘧啶類的氟化物,屬于抗代謝抗腫瘤藥,對(duì)增殖性細(xì)胞有殺傷性作用。5-Fu是臨床zui常用的抗腫瘤藥之一,適用于消化道癌、乳腺癌、卵巢癌、宮jin癌、膀胱癌、肺癌、頭頸部癌等多種惡性腫瘤。近年來(lái),有關(guān)5-Fu的研究相當(dāng)廣泛和深入,由于5-Fu具有在機(jī)體內(nèi)的代謝較快(半衰期僅為15-20min)、個(gè)體差異大的特點(diǎn),因此,一個(gè)可靠、簡(jiǎn)便、快速、靈敏的濃度分析方法在5-Fu的基礎(chǔ)研究和臨床應(yīng)用中均具有重要的作用。

   目前,國(guó)內(nèi)外應(yīng)用反相液相色譜方法分析5-Fu的報(bào)道有許多,但各自均具有定量下限濃度較高(范圍在30-2000μg/L)、內(nèi)源物干擾大、易造成柱效降低,樣品分析時(shí)間長(zhǎng)等缺點(diǎn)。因此,我們?cè)谖墨I(xiàn)的基礎(chǔ)上進(jìn)行了探索和改進(jìn),建立了反相高效液相色譜法測(cè)定微量5-氟*兔血清濃度的方法,本方法可靠、重復(fù)性好,在5-80μg/L范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系,具有特異性強(qiáng)、靈敏、精密度與準(zhǔn)確度高等特點(diǎn),可滿足5-氟*藥代動(dòng)力學(xué)研究的要求。

儀器準(zhǔn)備

 

儀器簡(jiǎn)介

    LC-600A智能全控液相色譜系統(tǒng)由P600高壓恒流泵與UV600紫外檢測(cè)器直接構(gòu)成等度分析系統(tǒng)。使用WS600工作站可以同時(shí)控制數(shù)臺(tái)P600高壓恒流泵、UV600紫外檢測(cè)器及恒溫柱箱等,實(shí)行多元高壓洗脫、波長(zhǎng)掃描等功能。

 

應(yīng)用領(lǐng)域

化合物檢測(cè)、法醫(yī)毒物分析、蛋白質(zhì)組學(xué)食品檢測(cè)、藥物分析、環(huán)境分析、聚合物分析

 

譜條件:

 

色譜柱

 Kromasil-C18柱,(4.6mm×250mm ,5μm)

流動(dòng)相

20mM醋酸銨/乙腈(98.2:1.8,pH=8.05)

紫外檢測(cè)波長(zhǎng)

270nm

進(jìn)樣量

20μL

流速

0.8mL/min

 

樣品處理方法:

 

用精密移液器吸取血漿樣本200μL于10mL離心管中,加入乙酸乙酯/異丙醇(84:16)萃取液3mL,渦旋2min,3500r/min離心15min;取上清液于0.45μm有機(jī)微孔濾膜過(guò)濾后,濾液于56℃水浴中氮?dú)獯蹈?;干燥后加?00μL流動(dòng)相溶解,進(jìn)樣20μL分析

 

譜圖分析:


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