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高效液相色譜法測定兔血清中*的濃度

閱讀:526發(fā)布時間:2020-6-11

    *是一種新型氮雜螺環(huán)癸烷雙酮類抗焦慮藥物,由于其在治療過程中具有不產(chǎn)生鎮(zhèn)靜作用以及不良反應少的優(yōu)點,目前已成為較理想的抗焦慮藥物。據(jù)有關文獻報道,該藥由于肝臟首過效應體內(nèi)含量較低,其血藥濃度測定方法僅有氣-質(zhì)聯(lián)用法。文章采用高效液相色譜法,以甲基叔丁基醚提取血清樣本測定濃度,方法分辨率高,可避免血清成分干擾,具有快速、準確、靈敏的特性,適用于臨床藥物研究及血藥濃度檢測。

儀器準備

 

儀器簡介

    LC-600A智能全控液相色譜系統(tǒng)由P600高壓恒流泵與UV600紫外檢測器直接構(gòu)成等度分析系統(tǒng)。使用WS600工作站可以同時控制數(shù)臺P600高壓恒流泵、UV600紫外檢測器及恒溫柱箱等,實行多元高壓洗脫、波長掃描等功能。

 

應用領域

化合物檢測、法醫(yī)毒物分析、蛋白質(zhì)組學食品檢測、藥物分析、環(huán)境分析、聚合物分析

 

血清樣品處理:

精密量取血清樣品2ml,置于具塞試管中,加入內(nèi)標溶液10μl(含對羥基苯甲酸乙酯10μg/ml),旋渦振蕩10s,加入1mol/L碳酸鈉溶液1ml,旋渦振蕩30s,加入甲基叔丁基醚-正己烷(1:1)混合溶液3ml,旋渦振蕩2min,以3000r/min離心6min,吸取上層有機相,重復提取2次,合并提取液,以(60±1)℃水浴恒溫氮氣吹干,殘渣加0.02mol/L HC1溶液200μl,旋渦振蕩1min,再以1000r/min離心6min,吸取60μl進樣,在色譜條件下測定記錄內(nèi)標及樣品峰面積

譜條件:

 

色譜柱

ZORBAX SB - C18(4.6mm×250mm,5μm)

流動相

甲醇-乙腈-水-0.1mol/L醋酸鈉緩沖液(pH4.5)(10:38:51:1)

流速

1.0mL/min

檢測波長

237nm

zui低檢出限

1.0ng/ml

 

譜圖分析

 


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