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更新時間：2015-04-20 15:30:48瀏覽次數(shù)：86次
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人乳腺上皮細(xì)胞,MCF-10A進(jìn)口細(xì)胞基本特性
形態(tài)特性：上皮樣
生長特性：貼壁生長
特征特性：人乳腺上皮細(xì)胞,MCF-10A細(xì)胞
培養(yǎng)條件：DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES,
with NEAA Medium) 5%HS + 10ug/ml insulin + 20ng/ml EGF + 100ng/ml 霍亂毒素 +
0.5ug/ml *
傳代方法：
傳代情況：
凍存條件：基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測：培養(yǎng)法（-）
STR：
染色體：
使用權(quán)限：A類
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客戶收到細(xì)胞后，請鏡下觀察細(xì)胞，用恰當(dāng)方式處理細(xì)胞。若懸浮的細(xì)胞較多，請離心收集細(xì)胞，接種到一個新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液，使用新鮮配制的培養(yǎng)基，使用進(jìn)口胎牛血清. 剛接到細(xì)胞，若細(xì)胞不多時 血清濃度可以加到15％去培養(yǎng)。若細(xì)胞迏到80%左右 ，血清濃度還是在10％。
操作臺的滅菌處理：
1)無菌室及無菌操作臺(laminarflow)用紫外燈照射30-60分鐘滅菌，70%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟無菌操作臺風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘。
2)細(xì)胞用的培養(yǎng)基如有相同切記不可共享培養(yǎng)基，以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。 (注：實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在抬面之*無菌區(qū)域，勿在邊緣之非無菌區(qū)域操作。)
培養(yǎng)細(xì)胞將復(fù)合細(xì)胞計數(shù)要求的細(xì)胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶內(nèi)，將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)2-4小時(或者24-48小時)后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng)，換液的時間由細(xì)胞情況而定。
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