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上海博研生物工程研究中心
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更新時間：2015-04-20 16:12:09瀏覽次數(shù)：49次
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人視網(wǎng)膜母細胞瘤,Y79進口細胞基本特性
形態(tài)特性：圓形，成簇生長
生長特性：懸浮生長
特征特性：人視網(wǎng)膜母細胞瘤,Y79細胞. 1971年1月，該細胞由Reid
TW及其同事從病人右眼切除的腫瘤進行原代培養(yǎng)建立而成，此病人有很強的視網(wǎng)膜母細胞瘤的母系家族遺傳性。該細胞的超微結構，如核膜內折、三層膜結構、大的被膜小泡、環(huán)孔板、微管、中心粒、基粒等都與原始腫瘤相似。
培養(yǎng)條件：RPMI 1640 (w/o Hepes) 20%FBS
傳代方法：1:2~1:4傳代，每周2次換液。
傳代情況：C5
凍存條件：基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測：培養(yǎng)法（-）
STR：
染色體：40~49
使用權限：A類
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客戶收到細胞后，請鏡下觀察細胞，用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多，請離心收集細胞，接種到一個新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液，使用新鮮配制的培養(yǎng)基，使用進口胎牛血清. 剛接到細胞，若細胞不多時 血清濃度可以加到15％去培養(yǎng)。若細胞迏到80%左右 ，血清濃度還是在10％。
操作臺的滅菌處理：
1)無菌室及無菌操作臺(laminarflow)用紫外燈照射30-60分鐘滅菌，70%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟無菌操作臺風扇運轉10分鐘。
2)細胞用的培養(yǎng)基如有相同切記不可共享培養(yǎng)基，以避免失誤混淆或細胞間污染。 (注：實驗操作應在抬面之*無菌區(qū)域，勿在邊緣之非無菌區(qū)域操作。)
培養(yǎng)細胞將復合細胞計數(shù)要求的細胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶內，將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內2-4小時(或者24-48小時)后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng)，換液的時間由細胞情況而定。
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