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明膠酶譜試劑盒出條帶的小技巧
很多老師在購買了我們明膠酶譜試劑盒之后,不知道應該如何操作,才能很快做出條帶,信帆生物技術給您答疑解惑。
實驗中的小貼士告訴大家:
1.做酶譜要測定樣品蛋白的濃度(同Western blot,建議用BCA法);
2.酶譜法是測定樣品中MMP-2、9活性的,如果煮沸使蛋白變性就沒有用了,故禁忌煮沸;
3.上樣緩沖液中也不能加β-巰基乙醇,這點由western blot轉作明膠酶譜的朋友切記、切記;
4.蛋白上樣量必須保證一樣,不會出現一致的透明條帶,如果不能保證上樣量一致,測出的相對活性也沒有統(tǒng)計分析的意義;
5.上樣時非常重要的一點,必須在4℃環(huán)境中操作,一般用的是冰臺,同時所用的蛋白樣品(-80℃冰箱)不能是以前曾解凍使用過的,必須是新取出的,因為只要解凍就會有部分酶降解,影響你的結果。此外做過一次酶譜的蛋白樣品也不要反復使用,下次應使用其它已分裝、未解凍過的樣品;
6.電泳后的步驟很簡單,液體別配錯,照著方法做就可以了。
如果你曾做過Western blot,在這里恭喜你了,只要注意幾個小細節(jié),明膠酶譜對您非常簡單。
另外上海信帆生物科技有限公司提供各類實驗代測服務,包括WB實驗代測,免疫組化實驗代測,放免實驗代測,生化實驗代測等到,上海和南京地區(qū)的客戶可以提供免費上門取樣服務。其他地區(qū)的客戶,樣本用泡沫箱子包好,放干冰或者冰袋寄送給我們。代測時間根據實驗內容而定,通常為5到15個工作.提供原始數據,分析數據, 實驗操作步驟以及實驗所用儀器。
明膠酶譜試劑盒如何操作才會出結果
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