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IgM 類單克隆抗體純化試劑盒使用說明書
立可純C080202(50ML 純化量)
試劑原理:
本試劑盒利用不同類別免疫球蛋白結(jié)構(gòu)特性,通過大量實(shí)驗(yàn)分析驗(yàn)證而得到
的一個(gè)與傳統(tǒng)純化*不同的精細(xì)的具有高活性、高產(chǎn)率、快速以及良好重
復(fù)性的單克隆抗體的純化方法,本試劑盒所用材料對(duì)人體沒有損害,安全環(huán)
保。
試劑特點(diǎn):
本試劑盒特點(diǎn)在于純化操作的簡單化、所得抗體的高活性和高純
度。實(shí)驗(yàn)表明,本試劑盒可以得到95%左右純度的抗體;并且由于配方考究,
抗體在純化過程中幾乎沒有損傷,*保持應(yīng)有的活性,實(shí)際應(yīng)用*。
適用范圍:
本試劑盒僅適用于小鼠IgM 類單克隆抗體腹水的純化,不能用于其它
Ig 類或亞類單克隆抗體腹水的純化實(shí)驗(yàn),如需要可選擇立可純系列其它貨號(hào)
的純化試劑,它能為您帶來滿意結(jié)果。
試劑組成:
試劑名稱數(shù)量試劑名稱數(shù)量
純化液A 65ml 30X 濃縮透析液150ml
純化液B 50mL 透析袋1 根
純化液C 30mL 說明書1 份
純化液D 40mL 空白不干膠標(biāo)簽2 片
純化步驟:
1、將單克隆抗體腹水從冰箱中取出,室溫避光放置15 分鐘,然
后用涼水邊沖邊搖勻快速解凍。
2、將化開的單克隆抗體腹水12000RPM 4-37℃離心10-20 分鐘。
3、先吸棄zui上面浮沫和油脂,然后將上清轉(zhuǎn)出到另一個(gè)干凈容器或離心管;
按每1 毫升單克隆抗體腹水加入純化液A 1.3 毫升,室溫避光倒轉(zhuǎn)20 分。
4、8000RPM 4-37℃離心10-20 分鐘,沉淀用純化液B 溶解到原單克隆抗體腹
水1/2 體積;再按每毫升加入純化液C 1.2 毫升,室溫避光倒轉(zhuǎn)10 分鐘。
5、8000RPM 4-37℃離心10-20 分鐘,棄沉淀收集上清;每1.1 毫升上清液加
純化液D 1.2 毫升,室溫避光倒轉(zhuǎn)20 分鐘。
6、8000RPM 4-37℃離心10-20 分鐘,收集沉淀用純化液B 收集溶解沉淀到原
單克隆抗體腹水體積的1/2。
7、透析袋用PBST 浸泡3-5 分鐘,然后用手揉捏數(shù)次,自來水沖凈后接純水沖
洗干凈,將純化好的抗體放入用透析夾或繩扎緊。
8、透析液用純水稀釋30 倍,將要透析的抗體袋子放入??贵w體積:透析液體
積=1:50,4℃攪拌透析每次1 小時(shí),共3-4 次。
9、8000RPM 4-37℃離心10-20 分鐘,收集上清測(cè)蛋白濃度并調(diào)控在5mg/ml
左右zui后加10/萬NaN3 防腐并除菌過濾4℃?zhèn)溆谩?br>注意事項(xiàng):
1、溶血和腐敗的腹水不得用于純化(血性腹水離心后除去紅細(xì)胞等可正常純
化)。
2、離心溫度不要超過37℃。
3、操作和量取試劑要細(xì)致。
4、不攪拌透析每次時(shí)間不得低于2 小時(shí)。
相關(guān)產(chǎn)品:
小鼠IgA類單克隆抗體純化試劑盒
小鼠IgG類單克隆抗體純化試劑盒
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