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當(dāng)前位置:上海酶聯(lián)生物研究所>>技術(shù)文章>>ELISA試劑盒歩驟分析
其根本辦法是將已知的抗原或許抗體吸附在固相載體外表,并堅(jiān)持其免疫活性。然后抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體,這種酶標(biāo)抗原或抗體既保存其免疫活性,elisa試劑盒又保存酶的活性。在測(cè)守時(shí),把受檢標(biāo)本(測(cè)定其間的抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原或抗體按不同與固相載體外表的抗原或抗體起反響。用洗刷的辦法使固相載體上構(gòu)成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開(kāi),zui終結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成必定的比例。參加酶反響的底物后,底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)品,產(chǎn)品的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)色彩反響的深淺刊物定性或定量分析。
大家看到此進(jìn)程中有一個(gè)“固相載體”,那就是酶標(biāo)板。酶標(biāo)板是一種配合在酶標(biāo)儀上,用來(lái)做酶聯(lián)免疫試驗(yàn)的耗材。盡管它看上去只是一塊普通的有孔的塑料板,elisa試劑盒但是在酶免疫測(cè)定中卻是一個(gè)不行短少的部分。所以能夠知道,酶標(biāo)板是一個(gè)不行短少的中介,沒(méi)有了這個(gè)中介,整個(gè)試驗(yàn)就無(wú)法進(jìn)行操作。換一句話(huà)說(shuō),只需你用酶標(biāo)儀做酶聯(lián)免疫試驗(yàn),就必然會(huì)用到酶標(biāo)板?;虿灰椎玫綕M(mǎn)足的純化抗原時(shí),可用此法檢測(cè)特異性抗體。其原理為標(biāo)本中的抗體和必定量的酶標(biāo)抗體競(jìng)賽與固相抗原結(jié)合。標(biāo)本中抗體量越多,結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗體愈少,因而陽(yáng)性反響呈色淺于陰性反響。
如抗原為高純度的,可直接包被固相。如抗原中會(huì)有攪擾物質(zhì),直接包被不易成功,可選用捕獲包被法,即先包被與固相抗原相應(yīng)的抗體,然后參加抗原,構(gòu)成固相抗原。洗刷除掉抗原中的雜質(zhì),然后再加標(biāo)本和酶標(biāo)抗體進(jìn)行競(jìng)賽結(jié)合反響。競(jìng)賽法測(cè)抗體有多種形式,可將標(biāo)本和酶標(biāo)抗體與固相抗原競(jìng)賽結(jié)合,抗hbelisa試劑盒一般選用此法。另一種形式為將標(biāo)本與抗原一同參加到固相抗體中進(jìn)行競(jìng)賽結(jié)合,洗刷后再參加酶標(biāo)抗體,與結(jié)合在固相上的抗原反響??筯be的檢測(cè)一般選用此法。
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