ELISA試劑盒DAB顯色時刻過長或濃度過高，顯色時刻不超越5-12分鐘會導(dǎo)致染色過強，孵育的溫度一般在室溫20-28度，抗體濃度過高或孵育時刻過長都會下降抗體滴度，操作中增加試劑時緩沖液未瀝干應(yīng)該每步滴加試劑前瀝干切片中剩余的緩沖液，這樣可以防止染色變?nèi)酰噭┏接杏檬褂脮r刻應(yīng)替換試劑，每步?jīng)_刷3次每次5分鐘。
 
選擇ELISA試劑盒應(yīng)盡量選擇正規(guī)廠家，產(chǎn)品經(jīng)相應(yīng)部門審閱認可，試劑應(yīng)從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、安全性及經(jīng)濟性全面點評。
靈敏度：有二層意義，
1. 為試劑檢出被檢物質(zhì)的低量的才能
2. 為試劑對很多樣品中陽性檢出的才能
特異性：常用穿插反響率表明。含有與待測物附近結(jié)構(gòu)部份的物質(zhì)可能存在穿插反響，使測定成果升高，可能導(dǎo)致假陽性，所以穿插反響是點評其質(zhì)量的要害目標。
精密度：ELISA試劑盒一般指其批內(nèi)CV%，其值應(yīng)小于15%；定量試劑應(yīng)一起調(diào)查線性規(guī)模。
準確度：經(jīng)過增加回收實驗進行點評。
簡便性：指在不影響試劑的前三項目標的前題下，實驗和測定過程越少越好，在定性實驗中成果判斷簡單明了，定量實驗成果核算也應(yīng)簡單。
安全性：指試劑對操作者和環(huán)境安全無害無傳染性。
經(jīng)濟性：試劑在平等質(zhì)量條件下經(jīng)過大規(guī)模出產(chǎn)或技術(shù)進步下降成本，而市場價格比較合理。
試劑點評：需求有威望的確證辦法和確證的樣品進行檢測。