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當(dāng)前位置:上海酶聯(lián)生物研究所>>技術(shù)文章>>ELISA試劑盒加樣的正確方法
上海酶聯(lián)生物是一家專業(yè)署理Elisa試劑盒、生物試劑、血清、抗體、標(biāo)準(zhǔn)品對照品、培養(yǎng)基、細(xì)胞公司,首要出售Elisa試劑盒和生物試劑,上海酶聯(lián)公司效力理念:“悉數(shù)以誠信為本,悉數(shù)以用戶價(jià)值為依歸!為顧客供給售前、售中、售后效力,不求,只為更好”。
在ELISA中除了包被外,一般需進(jìn)行4-5次加樣。在定性測定中有時(shí)不強(qiáng)調(diào)加樣量的準(zhǔn)確性,例如規(guī)則為加樣一滴。此時(shí)應(yīng)該運(yùn)用相同口徑的滴管,堅(jiān)持準(zhǔn)確的加樣姿態(tài),使每滴液體的體積底子相同。在定量測定中則加樣量應(yīng)力求準(zhǔn)確。標(biāo)本和結(jié)合物的稀釋液應(yīng)按規(guī)則制造。加樣時(shí)應(yīng)將液體加在孔底,避免加在孔壁上部,并留心不可出現(xiàn)氣泡。
ELISA中加樣須留心如下問題:
1. 汲取樣品時(shí),加樣槍吸頭不應(yīng)黏附剩余的液體;加樣時(shí)不可90度向孔中滴加液體,這樣會導(dǎo)致液體殘留在吸頭上,加樣不準(zhǔn)確!
2. 不要將吸頭伸入孔中,一方面若接觸孔底可能壓彎吸頭,另一方面可能會將孔中的液體吹起來,加樣不準(zhǔn)確!
正確的加樣方法應(yīng)為45度,吸頭貼著孔壁參與,應(yīng)留心:
1. 角度太小,會使液體殘留在孔壁上,導(dǎo)致加樣不準(zhǔn)確!
2. 吸頭應(yīng)當(dāng)貼著管壁和液面的交界處
運(yùn)用微量加樣器加樣有必要留心的要害點(diǎn)是:加樣不可太快,要避免加在孔壁上部,不可濺起和發(fā)作氣泡。加樣太快,無法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū),易導(dǎo)致非特異吸附。濺起會對鄰近孔發(fā)作污染。出現(xiàn)氣泡則反響液界面有差異。試劑的參與在國產(chǎn)試劑盒中底子上均是從滴瓶中滴加,除了要留心滴加的角度外,滴加的速度也很重要,滴加太快,很簡單出現(xiàn)重復(fù)滴加或加在兩孔之間的現(xiàn)象,這樣就會在孔內(nèi)的非包被區(qū)出現(xiàn)非特異吸附,然后引起非特異顯色。
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