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當(dāng)前位置:上海酶聯(lián)生物研究所>>技術(shù)文章>>科普小鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作技巧
小鼠ELISA試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。該法適于測(cè)定細(xì)胞培養(yǎng)上清、血清、血漿及組織液中的樣本,干擾小可以測(cè)到每毫升納克水平的細(xì)胞因子(或受體)的水平。
在這種測(cè)定方法中有3種必要的試劑:
①酶標(biāo)記的抗原或抗體。
②固相的抗原或抗體。
③酶作用的底物。
根據(jù)小鼠ELISA試劑盒的來(lái)源和標(biāo)本的性狀以及檢測(cè)的具備條件,可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測(cè)方法。
(一)雙抗體夾心法。
(二)雙位點(diǎn)一步法。
(三)競(jìng)爭(zhēng)法。
(四)間接法測(cè)抗體。
(五)捕獲法測(cè)IgM抗體。
(六)應(yīng)用親和素和*。
小鼠ELISA試劑盒普遍用作非放射性同位素的成鍵化驗(yàn)。在這種方法中, 通常標(biāo)準(zhǔn)配體是固定的, 通過(guò)加入溶液相受體或蛋白質(zhì)來(lái)使之成鍵。通過(guò)加入與受體特異性反應(yīng)的抗體來(lái)定量成鍵的受體,而且一開(kāi)始抗體的量以加入第二種能顯色的抗體測(cè)量。第二種抗體能識(shí)別抗體的末端,在其末端的堿性磷酸酯或過(guò)氧化物酶等與酶發(fā)生反應(yīng),從而使溶液顯色。
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