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當(dāng)前位置:上海酶聯(lián)生物研究所>>技術(shù)文章>>實(shí)驗(yàn)中怎樣染色才會(huì)到達(dá)Z佳程度
初度做凋亡,一般依照試劑盒說明書做即可,但要附上陽(yáng)性對(duì)照。根據(jù)成果進(jìn)行對(duì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)程調(diào)整。實(shí)
驗(yàn)進(jìn)程中tunel酶反響的時(shí)刻、過氧化氫的滅活時(shí)刻、DAB染色時(shí)刻、蘇木素復(fù)染時(shí)刻、PBS浸洗時(shí)刻
等都可以經(jīng)過前次實(shí)驗(yàn)成果進(jìn)行微調(diào)從而使實(shí)驗(yàn)染色到達(dá)*。
弧菌成長(zhǎng)曲線:
以終濃度為102CFU/ml(怎么制造一個(gè)這樣濃度的細(xì)菌?)別離接種各弧菌2216E培養(yǎng)基中,28℃靜置
培養(yǎng),每隔3小時(shí)取樣,用分光光度計(jì)測(cè)OD值,波長(zhǎng)為600nm。
菌膜測(cè)定辦法:
1、將待測(cè)硅酸鹽玻璃試管或聚苯乙烯96孔板中的菌液小心腸倒掉;
2、用自來水柔軟地沖刷,將殘余的培養(yǎng)基及游離細(xì)胞洗去,倒置頃刻,將殘留的液體滴干;
3、參加與發(fā)酵液(是培養(yǎng)基嗎?)等體積的結(jié)晶紫染色液,應(yīng)沒過細(xì)菌生物膜發(fā)生界面(生物膜發(fā)生
界面在哪),輕柔振動(dòng),染色30min;
4、傾去染色液,用自來水柔軟地沖刷1-2次,倒置頃刻,將殘留的液體滴干;
5、參加與染色液等體積的脫色液(脫色液是什么???),輕柔振動(dòng),脫色15min;
6、將脫色液定容(怎么定容?),用分光光度計(jì)測(cè)定吸光度,波長(zhǎng)為570nm,記錄成果。
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